亚硝胺类原料药相关杂质（NDSRI）是亚硝胺类杂质中一类特殊的杂质，与传统小分子亚硝胺杂质不同，NDSRI与原料药具有结构相似性（在化学结构中具有原料药或原料药片段），故每种原料药均有其特有的NDSRI。自2023年8月美国食品药品管理局首次发布一项关于NDSRI的指导原则以来，此类杂质就越来越受关注。为保障人体用药安全，必须对NDSRI实施严格管控。本文系统阐述了NDSRI的形成机制与主要来源，并分别从风险评估、限度制定、分析方法及清除策略4个维度，深入剖析了其控制策略，旨在为NDSRI的有效治理提供系统性的参考与借鉴。

亚硝胺类原料药相关杂质（nitrosamine drug substance-related impurities，NDSRI）是亚硝胺类杂质中一类特殊的杂质，与原料药具有结构相似性，每种原料药含有特有的NDSRI杂质。2020年7月，世界卫生组织首次通告，从赛诺菲公司的抗结核药利福平和利福喷丁中分别检出2种NDSRI：1-甲基-4-亚硝基哌嗪（1-methyl-4-nitrosopiperazine，MNP）和1-环戊基-4-亚硝基哌嗪（1-cyclopentyl-4-nitrosopiperazine，CPNP），导致利福平、利福喷丁被召回^［1-2］。2021年7月，辉瑞公司的戒烟药酒石酸伐尼克兰中检出一种NDSRI为N-亚硝基-伐尼克兰，导致产品被召回^［3］。2022年3月和12月，因一种NDSRI为N-亚硝基-喹那普利检测超标，辉瑞公司降压药盐酸喹那普利^［4］和鲁宾公司的降压药喹那普利片^［5］先后被召回。上述因NDSRI超标导致产品被召回事件引起了各国监管机构、制药企业和研究单位对NDSRI的高度重视。不同于小分子亚硝胺杂质，该类杂质往往缺乏致癌性和致突变性研究数据，因此无法直接确定可接受摄入量（acceptable intake，AI）限度，这也是该类杂质控制的一大难点。美国食品药品管理局（FDA）于2023年8月首先发布了关于NDSRI的指导原则——《亚硝胺类原料药相关杂质推荐AI限度行业指导原则［Recommended acceptable intake limits for nitrosamine drug substance-related impurities （NDSRIs） guidance for industry］》^［6］，该指导原则介绍了根据NDSRI的结构特点预测其潜在致癌性，并进一步确定AI限度的方法，为广大研究者提供了思路和借鉴。上述指导原则发布后，行业内对此类杂质的研究日益增多。我国目前尚无NDSRI专项指导原则，本文拟以FDA的指导原则为参考，总结近几年的研究进展，系统介绍NDSRI形成机制及主要来源，并从风险评估、限度确定、分析方法和清除策略4个方面详细分析NDSRI的控制策略，旨在为我国实现NDSRI的有效控制、提升药品质量和保障人体用药安全提供借鉴。

1 NDSRI形成机制及主要来源

1.1 形成机制

NDSRI与原料药结构相似（杂质结构中具有原料药或原料药片段），因此每种原料药都有其特有的NDSRI。NDSRI通常由制剂中含有仲胺或叔胺的原料药或原料药片段，在接触亚硝化试剂（如亚硝酸盐、亚硝酰卤化物、亚硝酸酯、三氧化二氮和四氧化二氮）时发生亚硝化反应形成。亚硝化反应是NDSRI最常见的形成机制，因任何含氨基的化合物都可能发生亚硝化反应^［7］，如利福平中1种NDSRI为MNP，由起始物料1-氨基- 4-甲基哌嗪接触NaNO₂等亚硝化试剂后，结构中的-NH₂转化为-NO，即生成MNP^［2］。

1.2 主要来源

NDSRI可通过多种途径引入，主要来源有生产工艺、外部污染和降解。

生产工艺引入主要由含仲胺或叔胺的原料药或原料药片段（起始物料、中间体），在工艺过程中，与亚硝化试剂（可能为主动添加，也可能由试剂、物料、包材、生产设备、环境等引入）发生亚硝化反应生成NDSRI，这也是最主要的来源。

外部污染引入主要由其他物料含有的NDSRI造成终产品的污染，如起始物料和中间体中含有的NDSRI被引入到原料药或制剂中。

降解途径生成NDSRI主要由原料药本身在生产或储存过程中，通过高温、高湿、光照、催化、酸、碱等因素作用发生降解生成NDSRI。

2 控制策略

在药品生产、质检、储存全过程都应对NDSRI进行严格控制，制定控制策略主要从风险评估、限度确定、分析方法和清除方式4个方面入手。

2.1 风险评估

风险评估是控制杂质的前提和基础。NDSRI的引入或产生途径复杂多样，应根据NDSRI的形成机制及工艺和储存条件，充分考虑所有潜在来源以进行风险评估，来源包括起始物料、中间体、原料药、辅料、水/溶剂、试剂/物料、生产设备、环境、不同批次产品交叉污染、包材、产品稳定性等。最常用的风险评估方法是人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）发布的关于质量风险管理核心指导原则ICH Q9中风险管理的基本方法之一鱼骨图^［8］，具体涉及的风险因素见图1。起始物料、中间体、原料药中主要的风险因素是由于物质本身含有仲胺或叔胺基团，接触亚硝化试剂发生反应后生成NDSRI；辅料、水/ 溶剂、试剂/物料、包材、生产设备、环境中主要的风险因素是存在亚硝酸盐等亚硝化试剂，其与药物中的仲胺或叔胺反应生成NDSRI；不同批次产品交叉污染主要是在同一生产线上不同批次的相同产品存在NDSRI残留，造成交叉污染；产品稳定性主要的风险为产品在储存过程中降解生成NDSRI或降解生成含原料药片段的胺类物质，胺与亚硝化试剂发生反应形成NDSRI。

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  图1 NDSRI的潜在风险因素

  Figure 1.Potential risk factors of NDSRIs

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根据ICH Q9，风险评估的基本流程为危害源识别→风险分析→风险评价^［8］。以替格瑞洛原料药中的NDSRI为例，李庆等^［9］在分析合成工艺时发现，中间体TG-4、TG-6及原料药中均含有-NH₂-和-NH-，由于合成过程中使用了NaNO₂/CH₃COOH进行重氮环化反应，故TG-4、TG-6及原料药接触NaNO₂后均有生成NDSRI的风险，对应的NDSRI分别为TG-4-NO、TG-6-NO及原料药-NO，三者的AI限度均为18 ng/d，因此TG-4、TG-6、原料药和NaNO₂即为危害源；其通过反应机理分析、试验论证（摸索杂质合成的工艺条件、结构鉴定等）进行风险分析，评估上述3种NDSRI生成的可能性，结果为TG-4-NO和原料药-NO无法合成制备，TG-6-NO会转化为原料药-NO，故3种杂质均无生成的可能性；风险评价是指将已经识别和分析的风险与给定的风险可接受标准进行比较，得出风险评估结果。通过危害源识别和风险分析，TG-4-NO、TG-6-NO及原料药-NO这3种NDSRI均无在工艺中产生的风险，必然低于AI限度。全面的来源预测、充分的风险评估是识别所有潜在NDSRI的关键前提，这一前置性风控策略为产品安全加固屏障。

2.2 限度确定

风险评估的结果（如某杂质无生成风险）可直接作为限度确定的依据，若风险评估显示有生成NDSRI的风险，则需确定AI限度作为可接受标准。NDSRI往往缺乏致癌性和致突变性研究数据，因此无法直接确定AI限度。为解决这一难点，FDA发布的指导原则^［6］介绍了2种确定NDSRI限度的方法：一种是推荐的预测致癌潜力分类方法（predicted carcinogenic potency categorization approach，PCPCA）；另一种是基于特定化合物评估或替代化合物交叉参照评估方法。

2.2.1 PCPCA法

PCPCA法是一种基于NDSRI的激活和失活结构特征预测NDSRI的致癌性分类，从而确定AI限度的方法。PCPCA法的原理是结合结构-活性关系来确定AI限度^［10-11］：该方法认为α-羟基化代谢激活机制是导致许多亚硝胺产生致突变性和高致癌性的原因^［12］，含有直接促进或抑制激活机制倾向的结构特征，或具有可通过其他生物途径加快亚硝胺清除的结构特征，均将对NDSRI致癌潜力产生相应的影响。综上所述，可基于NDSRI 的结构特征来预测其致突变和致癌潜力。该方法适用于N-亚硝基两侧各结合1个碳原子的NDSRI，这些碳原子不直接通过双键与杂原子连接（如N-亚硝基胺、N-亚硝基脲、N-亚硝基胍及其他类似分子结构均不包括在内），故该方法也不适用于N-亚硝基在芳环结构内的NDSRI（如亚硝基吲哚）。根据PCPCA法，预测的致癌潜力可分为5类，每一类均有对应的AI限度，具体见表1。

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  表格1 NDSRI 的5 种预测致癌潜力分类和相应推荐的AI限度

  Table 1.The 5 predicted carcinogenic potency categories and associated recommended AI limits for NDSRIs

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图2详细展示了如何运用PCPCA法将NDSRI 进行致癌潜力分类，并确定相应的AI限度。对于结构中含有2个或2个以上N-亚硝基的NDSRI，应选择预测致癌潜力最高的基团来确定整个分子的AI限度。

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  图2 预测NDSRI 致癌潜力分类并确定相应推荐的AI限度的流程图

  Figure 2.Flowchart to predict the carcinogenic potency category of an NDSRI and identify an associated recommended AI limit

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FDA公布了多达284种NDSRI的AI限度，均由PCPCA法得到，以便快速查阅^［14］。其余FDA未公布AI限度的杂质，可参照表1和图2，自行运用PCPCA法确定AI限度。以酒石酸伐尼克兰中的一种NDSRI——N-亚硝基-伐尼克兰为例（结构式见图3）。该杂质分子中不含叔胺α-碳原子，且每个α-碳原子上均连有2个氢原子，因此其α-氢原子分数为1。亚硝基位于1个七元环内，依据结构活性评估规则，该环状结构可使失活性能分数增加1。此外，亚硝基基团两侧各存在1条由 ≥ 5个连续非氢原子组成的链（可为环状或非环状），但由于2条链位于同一环内且每条链上原子数均不超过4个，因此失活性能分数再增加1。该结构不满足激活性能分数的赋分条件，故激活性能分数为0。按照FDA发布的指导原则，致癌潜力分数=α-H原子分数+失活性能分数+激活性能分数。经计算，上述杂质的致癌潜力分数为3，对照图2中分类标准归属于第3类，故AI限度为400 ng/d。此外，该指南附录A也提供了2个案例，用于示例评分过程及AI限值的确定方法^［6］。

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  图3 N-亚硝基-伐尼克兰的化学结构式

  Figure 3.The chemical structure of N-nitroso-varenicline

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上述指导原则同时指出，推荐的AI限度适用于单一NDSRI杂质。若产品中检出多个亚硝胺杂质［NDSRI和（或）小分子亚硝胺］，且按每日最大剂量折算后，所有亚硝胺杂质的总暴露量超过了其中致癌潜力最高的单个杂质所对应的AI限度，则生产企业或申请人应与监管机构进行沟通。若各亚硝胺杂质的推荐AI限度差异悬殊，直接以其中致癌潜力最高者的AI限值作为总亚硝胺杂质限度的判定依据，可能缺乏实际可操作性。在此情形下，FDA鼓励申请人主动与监管机构沟通，共同探讨针对多杂质情形的限度制定策略。

2.2.2 基于特定化合物评估或替代化合物交叉参照评估

如“2.2.1”项所述，通过PCPCA法制定AI限度并不适用于所有NDSRI，主要存在以下2种例外情形：其一，部分NDSRI的化学结构不适用该评估方法，例如N-亚硝基基团通过双键直接与碳原子连接的化合物；其二，产品中单个或多个NDSRI的含量水平已超出FDA推荐的AI限度。因此，上述指导原则给出另外2种确定AI限度的方法，即基于特定化合物的评估和基于替代化合物的交叉参照评估，以拟定替代AI限度^［6］。基于特定化合物评估应获得特定化合物的安全性数据，如致突变性数据（可通过Ames试验得到）^［15-16］；基于替代化合物的交叉参照评估，其核心思路是依据替代化合物为NDSRI推导一个合理的AI限度。该AI限度是基于该替代化合物对应十万分之一的癌症风险水平确定，其数值可能高于通过PCPCA法计算所得的AI限度。FDA建议选择具备可靠致癌性数据的替代化合物进行交叉参照评估。然而，FDA同时指出，在实际操作中，通常难以找到一种能够充分代表目标NDSRI结构特征与作用机制且经过可靠毒理学测试的亚硝胺类替代化合物。因此，FDA推荐了几种具有较可靠的致突变和致癌性数据的亚硝胺化合物，可作为替代化合物，如：N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基哌啶、4-（甲基亚硝胺）-1-（3-吡啶基）-1-丁酮、N-亚硝基吡咯烷和N-亚硝基吗啉^［17］。研究者可参照基于特定化合物的评估或替代化合物交叉参照评估所确定的AI限度来制定目标NDSRI的AI限度。但无论采用上述何种方法，均需充分论证所拟定替代AI限度的科学合理性，并将相关研究资料提交监管机构审评。

2.3 分析方法

NDSRI的分析方法可参照小分子亚硝胺类杂质建立，常见的分析方法有气相色谱（GC）法、液相色谱（LC）法、气相色谱-质谱联用（GC-MS）法和液相色谱-质谱联用（LC-MS）法。为便于研究者建立NDSRI的分析方法，FDA与欧洲药品质量管理局（EDQM）均已公布部分药品中NDSRI的相关分析方法，代表性方法汇总见表2。

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  表格2 FDA和EDQM公布的部分NDSRI分析方法

  Table 2.Analytical methods for parts of NDSRIs issued by FDA and EDQM

  注：“—”表示文献中未提及；LC-ESI-HRMS：液相色谱-电喷雾电离-高分辨质谱法；LC-MS/MS：液相色谱-串联质谱法。

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虽然目前国内尚无关于NDSRI的指导原则，但近3年，国内研究者已对此类杂质的分析方法开展了积极探索，所采用的技术手段以LC法和LC-MS法为主，部分已报道的分析方法概况见表3。

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  表格3 国内研究者报道的部分NDSRI分析方法

  Table 3.Analytical methods for parts of NDSRIs reported by domestic researchers

  注：“—”表示文献中未提及；LC-HRMS：液相色谱-高分辨质谱联用法。

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2.3.1 LC法

有研究者采用HPLC法测定地氯雷他定口服溶液中一种NDSRI亚硝胺地氯雷他定^［26］。采用的检测器为紫外检测器，流动相为十二烷基硫酸钠溶液和乙腈的混合溶液，该方法定量限和检测限分别为5 ng/mL和1 ng/mL，灵敏度较高，且专属性和精密度均良好，检测结果准确可靠，为地氯雷他定口服溶液的质量控制和临床用药的安全性检测提供参考。LC法虽具有操作简捷、重复性好等优点，但灵敏度有限，通常难以满足大多数亚硝胺杂质微量或痕量的检测要求，故并未得到普及。

2.3.2 LC-MS法

LC-MS法具有高灵敏度，这一点很好地弥补了LC法的缺陷，适用于基因毒性杂质的检测。近3年内报道的NDSRI的分析方法中，LC-MS/MS和LC-HRMS为LC-MS法中2种主要的分析技术。

LC-MS/MS法可减少基质干扰造成的假阴性（离子抑制）或假阳性（共流出物或同位素干扰）发生，从而提高测试准确性，已成为一种较成熟的分析技术在基因毒性杂质领域广为应用。袁松等^［27］建立了超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定酒石酸伐尼克兰原料药和片剂中N-亚硝基-伐尼克兰。MS法采用电喷雾离子源正离子扫描（ESI⁺）和多反应监测定量模式。方法检测限和定量限分别为0.014 ng/mL和0.046 ng/mL；原料药的平均回收率为92.00%~103.58%；片剂的平均回收率为91.53%~93.01%。该方法灵敏度和准确度高，同时适用于测定酒石酸伐尼克兰原料药和片剂中N-亚硝基-伐尼克兰。陈小伟等^［28］建立了UPLC-MS/MS法测定比拉斯汀中2个NDSRI。MS法为ESI⁺和选择反应监测模式。结果显示，2个NDSRI定量限均为0.02 ng/mL，检测限均为0.006 ng/mL；平均回收率分别为101.0%和101.3%，RSD分别为1.0%和1.3%。该方法灵敏度高，专属性、线性与范围、重复性、准确度等参数均满足测试要求，为比拉斯汀中NDSRI的控制与研究提供了有益借鉴。韦梦瑶等^［29］建立了UPLC-MS/MS法检测磷酸伯氨喹原料药中一种NDSRI N-亚硝基-伯氨喹（2种异构体合并定量）。MS法同样为ESI⁺和多反应监测定量模式。结果显示，该法在0.10~16.10 ng/mL浓度范围内线性关系良好，呈现较宽的线性范围；检测限和定量限分别为0.03 ng/mL和0.1 ng/mL，灵敏度较高；3个浓度水平的平均回收率为95.0%~99.0%，RSD为1.3%~1.9%，准确度较高。该方法可作为磷酸伯氨喹中N-亚硝基-伯氨喹的质控方法，为规范、强化磷酸伯氨喹的质量提供了依据。LC-MS/MS法虽已成熟地应用于检测NDSRI乃至基因毒性杂质，但其分辨率较低的固有缺陷仍可能造成同质异位素干扰，从而降低测试准确性，这一点不容忽视。

LC-HRMS是将液相色谱与高分辨质量分析器（如飞行时间质谱、静电场轨道阱质谱）联用的分析技术。该法具有分辨率高、分析速度快等优势，可有效弥补LC-MS/MS法在定性能力和未知物筛查方面的不足，近年来已越来越多地应用于基因毒性杂质的检测。有研究^［30］建立了一种基于HPLC-HRMS同时检测伐尼克兰中间体中3种NDSRI（分别命名为A、B、C，结构式见表3）的方法。MS法采用ESI⁺模式，定量分析以平行反应监测模式进行。3种杂质的定量限均为1.56 ng/mL；线性浓度范围均为2~16 ng/mL（r ≥ 0.995 0）。该法体现出较强的专属性，避免假阳性杂质的检出，检测灵敏度较高，可实现伐尼克兰中间体中3种NDSRI的简单、快速、稳定、准确检测，可有效控制和提升伐尼克兰中间体的质量，进而保障用药安全。郭常川等^［31］采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用法分别测定了氢溴酸伏硫西汀片和盐酸托莫西汀胶囊^［32］中的NDSRI。MS法均为ESI⁺和平行反应监测定量模式。以氢溴酸伏硫西汀片中的N-亚硝基伏硫西汀及盐酸托莫西汀胶囊中的N-亚硝基-托莫西汀为研究对象，开展了NDSRI分析方法验证。结果显示，N-亚硝基-伏硫西汀的检测限和定量限分别为0.02 ng/mL和0.05 ng/mL；线性范围为0.20 ~ 40.61 ng/mL（r > 0.999 9），线性关系良好；3个浓度水平下的平均回收率为98.8%~101.7%，RSD为2.2%~3.4%；N-亚硝基-托莫西汀的检测限和定量限分别为0.01 ng/mL和0.03 ng/mL，在0.10~100.04 ng/mL浓度范围内线性关系良好（r = 0.999 9）；3个浓度水平的平均回收率为98.9%~101.2%，RSD为1.3%~2.4%。上述2种方法专属性、精密度和灵敏度均良好，可准确可靠地测定各自药品中的NDSRI，已应用于山东省内两种药品的检测。部分批次中N-亚硝基-伏硫西汀超标，N-亚硝基-托莫西汀有检出但未超标。该结果为药监部门加强监管和排查风险提供了数据支持。LC-HRMS法也被纳入监管机构的收录范围，如FDA发布了采用LC-ESI-HRMS技术测定不同药品中NDSRI的方法，部分方法见表2。LC-HRMS法凭借其高分辨率、高灵敏度、快速分析及结果准确等优势，能够很好地满足基因毒性杂质的检测需求。该方法有望成为未来基因毒性杂质分析的主要技术手段之一，并在NDSRI检测领域获得更广泛的应用。

无论监管机构公布或是研究者报道的方法，NDSRI的现行主流分析方法为LC-MS法，其可作为首选分析方法，但最终选择何种分析方法，尚需研究者综合杂质的结构与性质、控制限度、基质复杂程度、仪器灵敏度和精密度、实验室条件等各方面因素确定。

2.4 清除策略

由于NDSRI的致癌性和致突变性极强，对人体易造成很大的危害，再加上限度低，清除和测试难度大，故“避免为主，控制为辅”应成为针对此类杂质的清除策略^［33-37］。“避免为主”策略的核心在于提前预防NDSRI的产生，这种预防理念应贯穿于药品研发生产的各个阶段，包括原辅料及包材的选择、生产工艺的设计与优化、物料与试剂的回收利用、生产设备的选型、生产环境条件的控制、生产操作过程的规范性管理，以及清洁工艺的开发与优化等。可基于ICH Q9^［8］中的理念，采用科学合理的风险评估方法对生产工艺进行全面评估，尽量避免使用可能生成NDSRI的物料、试剂、包材等，如避免使用亚硝化试剂等。

“控制为辅”则指在经全面风险评估后仍无法避免NDSRI产生的情况下，应当系统分析杂质的成因与来源，并采取物料替换、试剂替换、生产设备更换、包材更换、生产工艺优化、清洁工艺优化、储存条件改善等综合性措施，以尽可能清除已生成的NDSRI或减少其残留量，确保产品中NDSRI的最终残留量控制在规定的AI限度以下。有研究^［38］在酒石酸伐尼克兰原料药的制备工艺中，通过避免使用亚硝化试剂并结合打浆处理，有效控制了产品中NDSRI的残留量。检测结果显示，原料药中2种NDSRI未检出，另1种NDSRI含量低于AI限度的10%，表明该策略可显著降低NDSRI的残留风险。还有研究^［39］在达肝素钠的制备工艺中，由于无法避免使用亚硝酸钠进行解聚以获得低分子量产品，遂在工艺中引入紫外光照射并加入过氧化氢，利用紫外光致消去原理及过氧化氢产生的羟基自由基的强氧化性，实现对N-NO基团的彻底清除。经此处理，所有批次产品中均未检出NDSRI，成功消除了亚硝胺类杂质的残留风险。另有研究^［40］在维格列汀制备过程中，通过优化产品纯化工艺来降低NDSRI的残留量。该工艺将维格列汀粗品与混合溶剂混合后，通过加入酸和碱调节体系pH值，再经升温、降温、过滤及干燥等步骤，制得终产品。检测结果显示，经纯化后终产品中NDSRI含量均低于规定限度。上述3个案例分别采用了3种不同的清除策略，均达到了预期的控制效果，对比结果见表4。酒石酸伐尼克兰的合成工艺中通过规避亚硝化试剂的使用，贯彻“避免为主”策略，将3种NDSRI残留量均控制在极低的水平。相比之下，维格列汀仅通过优化纯化工艺实施“控制为辅”策略，NDSRI虽可降至限度以下，但仍有检出，表明“避免为主”策略在残留控制方面更具优势。达肝素钠因工艺中必须使用亚硝酸钠进行解聚，故只能采用“控制为辅”策略，通过优化制备工艺实现NDSRI清除。综合上述分析，“控制为辅”策略通常需额外引入抑制或清除NDSRI的试剂、物料或设备，必然增加工艺复杂性与生产成本，因此更适用于无法避免使用亚硝化试剂的工艺场景。而“避免为主”策略无需对既有工艺进行重大调整，具有经济性高、操作简便等优势，尤其适用于起始物料、中间体及原料药本身无亚硝化风险的工艺路线，应作为NDSRI杂质清除的优先策略。

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  表格4 不同清除策略比较

  Table 4.Comparison of different elimination strategies

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3 结语

本文介绍了NDSRI形成机制及主要来源，并从风险评估、限度确定、分析方法和清除策略4个方面详细分析了NDSRI的控制策略，旨在为实现药品中NDSRI的有效控制、提升药品质量和保障人体用药安全提供借鉴。NDSRI的控制策略制定中，存在以下四大难点：第一，限度制定不合理，采用PCPCA法制定的AI限度超过FDA推荐的AI限度^［41］，或拟定的替代AI限度缺少合理性证明；第二，部分NDSRI缺少杂质对照品，为杂质鉴定和开发准确的定量方法带来困难；第三，缺少普适性的分析方法，尽管FDA和EDQM发布了一些分析方法，但大多为LC-MS/MS法或LC-HRMS法，采用的仪器如质谱仪，尤其是高分辨质谱仪的采购和维护成本较高，对于预算有限的单位是一项不小的挑战；第四，也是最为关键的一点，我国目前尚未出台针对NDSRI的专项指导原则，相关研究报道亦较为有限，研究者缺乏系统的研究依据与明确的指引方向。企业在限度确定方面应加强与监管机构的沟通交流；如无市售NDSRI对照品，研究者应尝试自行制备对照品；国家可在仪器购买方面给予政策支持，使高分辨质谱仪逐渐普及。随着我国国家药监局积极与国际接轨，参与ICH M7亚硝胺杂质亚组对于亚硝胺杂质的国际协调工作，我国也终究会拥有属于自己的NDSRI相关的指导原则。随着上述四大难点的逐步解决，NDSRI的研究基础将不断夯实。未来，被发现或被检出的NDSRI种类或将进一步增加，研究者应制定科学合理的NDSRI控制策略，持续为提升药品质量与保障公众用药安全提供有力支撑。

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