目的  探究平卧菊三七复方制剂（GPCP）的美白祛斑作用。

方法  运用紫外线扫描、酪氨酸酶抑制率测定、自由基清除实验等方法体外评估GPCP的美白能力；建立紫外线诱导的色素沉积模型检测GPCP的色素沉着调节能力和β-连环蛋白（β-catenin）、环氧化酶-2（COX-2）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的蛋白表达水平。

结果  体外实验结果表明，GPCP的紫外线吸收能力优于阳性药物熊果苷；平卧菊三七中的小分子化合物绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、对羟基肉桂酸不仅表现出较强的自由基清除活性，还表现出较强的酪氨酸酶活性抑制能力。动物实验结果表明，第1，7，15天时低、高剂量GPCP均能降低皮肤中的黑色素含量以及β-catenin、COX-2及MMP-9的蛋白表达水平。

结论  GPCP通过其良好的抗氧化活性以及酪氨酸酶抑制活性，减少皮肤中紫外诱导的色素沉着，这可能是通过下调MMP-9-COX-2/β-catenin通路信号实现。

中医称皮肤色斑，特别是面部色斑为“肝斑”“面尘”等，认为色斑多为肝郁脾虚、气血不足所致，当以疏肝健脾、补益气血为治。大量研究证实，平卧菊三七Gynura procumbens (Lour.) Merr.为菊科菊三七属攀援草本植物，对肝损伤有较好的预防和治疗效果[1]。平卧菊三七为具有清火解毒、消肿止痛及祛风利水之功效的傣药。本课题组前期研究已从平卧菊三七中分离出绿原酸、新绿原酸、对羟基肉桂酸以及异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C等多种多酚类活性成分[2]，这些多酚类成分具有较强的抗炎和抗氧化活性[3]。白芨一物归肺、肝、胃三经，而中医学认为，肺合皮毛，肺主气；气为血帅，若伤气耗血，或脉失濡养，致气血运行不畅，不能滋养肌肤，使其色淡无华、干燥无泽，故白芨与平卧菊三七配伍，既能养阴补血、益肺生肌，又可助平卧菊三七行疏肝解郁、活血祛瘀之效，且《本草纲目》中记载白芨有“洗面黑，祛斑”之效。在目前已确定的白芨活性成分中，以白芨多糖为其主要生物活性成分[4]。乳香性辛苦、温，入心、肝、脾经，有调气活血、定痛、追毒之功效，多用于胸痹心痛、胃脘疼痛、跌打损伤、痈肿疮疡等症。已有研究证实乳香中活性成分α-蒎烯、芳樟醇、正辛醇及三者混合物能有效减轻小鼠炎性肿胀和促进皮肤组织修复[5]。

研究者们对天然中草药美白祛斑功效的探索从未停止，但研究内容主要集中在中草药对黑色素合成的抑制方面，而忽视了其对紫外线、氧化损伤、炎症损伤等色斑形成条件的考察。基于此现状以及中医对色斑的辨证论治，本研究拟选用平卧菊三七、白芨、乳香等中药材进行配伍，制成平卧菊三七复方制剂（Gynura procumbens compound preparation, GPCP），并探讨其美白祛斑的功效及可能存在的效应机制，以期为该制剂的开发应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试药

Infite M200型酶标仪（美国TECEN公司）；TP1020型组织脱水机、EG1150型石蜡包埋机、RM2265型全自动石蜡切片机均购自德国Leica公司；N-MSI-FX型多光谱显微成像系统（美国PerkinElmer公司）；IX71型倒置光学显微镜（日本Nikon公司）；KBHJ-UV20W型紫外灯（东莞市森夏电子科技有限公司）。

平卧菊三七，采自海南省保亭黎苗族自治县，由中国科学院武汉植物研究所张炳坤教授鉴定为平卧菊三七Gynura procumbens (Lour.) Merr全草；白芨（批号：202008110201）、乳香（批号：202006230801）购自广州医药公司饮片厂；上述药材分别粉碎（过100目筛）备用。绿原酸（批号：A22GS158496，纯度≥ 98%）、新绿原酸（批号：P27A6F2713，纯度≥ 98%）、对羟基肉桂酸（批号：H05A601，纯度≥ 98%）、异绿原酸A（批号：P28O7F23862，纯度≥ 98%）、异绿原酸B（批号：P₂₅J6F1793，纯度≥ 98%）、异绿原酸C（批号：P₂₅J6F1794，纯度≥ 98%）、白芨多糖（批号：C13M11Y112914，纯度≥ 70%）、左旋多巴（L-DOPA，批号：J14N11S130931）、L-酪氨酸（L-Tyr，批号：J12D10R105619）、蘑菇酪氨酸酶（批号：S01N11Z127546）等对照品均购自上海源叶生物有限公司；α-蒎烯（批号：GF01-GNCS，纯度≥ 95%）、熊果苷（批号：C10224221，纯度98%）均购自上海梯希爱化成工业发展有限公司；芳樟醇（上海阿拉丁科技有限公司，批号：L1422057，纯度98%）；黑色素染色液（上海士锋生物科技有限公司，批号：20190904）；2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）试剂盒（批号：0120A22）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）试剂盒（批号：0120A22）购自北京雷根生物技术有限公司；鼠源基质金属蛋白酶9（matrix metalloprotease-9, MMP-9）多克隆抗体（美国Sigma公司，批号：1205）；羊源环氧化酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）多克隆抗体（批号：GR3205782-8）、兔源β-连环蛋白（β-catenin）多克隆抗体（批号：5500001128）均购自英国Abcam公司；二抗（批号：H1903A）、血清（批号：16I06A09）购自武汉博士德公司；3,3'-二氨基联苯胺（DAB，日本Nichirei Bioscience公司，批号：1294C236）；正辛醇（批号：20140312，≥ 99%）、二甲亚砜（DMSO，批号：20190716）、无水乙醇（批号：20211115）均购自国药集团化学试剂有限公司；生理盐水（武汉滨湖双鹤药业有限责任公司，批号：1807110903）。

1.2 实验动物

选取SPF级棕色雌性豚鼠45只，体重均300~400 g，购自湖北省实验动物中心，实验动物质量合格证号：42010000005430。动物均饲养于中南民族大学药学院SPF级动物饲养中心，环境设施许可证号：SYXK（鄂）2016-0089。本研究中动物的护理和使用按照中南民族大学动物实验指南进行，本实验经中南民族大学动物伦理委员会批准（审批号：2021-SCUEC-042）。

1.3 方法

1.3.1 GPCP的制备

参考相关文献[6]，制备平卧菊三七复方制剂，将食用植物油置入烧杯中，然后向其中加入适量的平卧菊三七、白芨、乳香等干药材粉末，静置浸泡7 d后，搅拌加热，油温85℃保持1 h后停止加热，过滤去渣后，待油温降至55℃时，向其中加入乳膏基质，充分搅匀，冷却，制得外用膏剂平卧菊三七复方制剂，装瓶后密闭储存。按上述方法分别制备了低、高2种不同剂量（平卧菊三七质量分数分别为1.5%和3%）的平卧菊三七复方制剂乳膏，分别为GPCPL、GPCPH。

1.3.2 紫外线吸收能力检测

参照GPCP的制备方法，利用各干药材制备白芨、乳香的单体膏剂以及白芨-乳香混合物膏剂（1 ∶ 1），另取熊果苷粉末制备7%的熊果苷膏剂，作为阳性对照。在液体状态下，用移液枪分别吸取白芨膏剂、乳香膏剂、白芨-乳香混合膏剂（1 ∶ 1）、GPCPL、熊果苷膏剂各100 μL，然后将5组膏剂分别平铺于96孔板中。采用酶标仪扫描样品，扫描间隔为10 nm，测定样品在280~400 nm波长之间的紫外吸光度（A）值，重复扫描3次。分别计算各样品在长波紫外线（ultraviolet A, UVA）（320~400 nm）、中波紫外线（ultraviolet B, UVB）（280~320 nm）波段各波长处A值的算术平均值（Ai），然后取3组平行样品Ai的算术平均值（A）表示样品的紫外线吸收能力。

1.3.3 自由基清除率测定

（1）对照品母液的配制：将平卧菊三七（绿原酸、新绿原酸、对羟基肉桂酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C）、白芨（白芨多糖）、乳香（α-蒎烯、芳樟醇、正辛醇）中各活性成分的对照品分别溶于DMSO，制备成浓度为10 mg·mL^-1的对照品母液。另取熊果苷粉末溶于DMSO制备成浓度为15 mg·mL^-1的熊果苷溶液。

（2）DPPH自由基清除率测定：参考文献[7]方法，将各对照品母液用无水乙醇稀释至所需浓度作为待测样品。取20 μL待测样品溶液加入到96孔板中，随后加入180 μL的DPPH乙醇溶液反复吹打混匀，于室温避光条件下静置30 min，最后在517 nm波长下测定各组A值，计算其DPPH自由基清除率，每个样本平行设置3个复孔。清除率计算公式为：

DPPH清除率=[（A1-A2）/A1]×100%

其中A1为只加DPPH溶液的A值，A2为加入样品和DPPH溶液的A值。

（3）ABTS自由基清除率测定：将各对照品母液用0.01 mol·L^-1、pH=6.8的PBS溶液稀释至所需浓度作为待测样品。取5 μL待测样品溶液加入到96孔板中，随后加入200 μL的ABTS工作液反复吹打混匀，于室温条件下静置5 min，最后在405 nm波长下测定各组A值，计算其ABTS自由基清除率，每个样本平行设置3个复孔。清除率计算公式为：

ABTS清除率=[（A1-A2）/A1]×100%

其中A1为PBS和ABTS溶液的A值，A2为样品和ABTS溶液的A值。

1.3.4 酪氨酸酶活性抑制检测

（1）二酚酶抑制率检测：参考文献[8]方法，用0.01 mol·L^-1、pH=6.8的PBS溶液稀释“1.3.3”项下各对照品母液至待测浓度。向96孔板中依次加入120 μL 2.5 mmol·L^-1的L-DOPA溶液和40 μL待测样品溶液，混匀后在37℃下孵育10 min，此时再加入40 μL 350 U·mL^-1的酪氨酸酶溶液，随后立即将孔板置于酶标仪中，于475 nm处测定各组A值，每个样本平行设置3个复孔。酪氨酸酶的抑制率计算公式如下：

酪氨酸酶抑制率=[1-（A1-A2）/A3]×100%

其中A1为加入测试样和酪氨酸酶溶液后反应液的A值，A2为加了测试样而未加酪氨酸酶溶液的A值，A3为加了酪氨酸酶而未加测试样的A值。

（2）单酚酶抑制率检测：参照上述二酚酶抑制率检测方法，对各试剂的量作适当调整。向96孔板中依次加入150 μL的PBS缓冲液、90 μL 1 mmol·L^-1的L-Tyr溶液和30 μL的待测样品溶液，混匀后在37℃下孵育10 min，此时再加入30 μL 250 U·mL^-1的酪氨酸酶溶液，随后立即测其在波长475 nm处的A值，每个样本平行设置3个复孔。抑制率计算公式同“二酚酶抑制率检测”项。

1.3.5 紫外线诱导色素沉着模型的建立与给药

取45只豚鼠，按照每组9只的数量将其随机分为正常对照组（不做紫外线照射，涂抹生理盐水）、模型组（紫外线照射后涂抹生理盐水）、GPCP低（紫外线照射后涂抹GPCPL）、高（紫外线照射后涂抹GPCPH）剂量组和熊果苷组（阳性对照，紫外线照射后涂抹7%熊果苷）。实验前先将豚鼠背部毛脱去，脱毛时不能损伤豚鼠背部皮肤；然后使用UVA波段（320~400 nm）紫外灯按0.75倍最小红斑剂量每天照射豚鼠背部相同部位皮肤，每次15 min，照射后立即涂抹给药，药物用量为0.15 mL·cm-2。实验期间，豚鼠正常饲养，每2 d进行1次脱毛。在实验进行的第1，7，15天时，从每组中随机选取3只豚鼠对其背部皮肤进行拍照记录，然后使用二氧化碳吸入法处死，取豚鼠给药部位皮肤制作组织切片备用。

1.3.6 银染法检测皮肤中黑色素分布

取给药部位皮肤用10%中性甲醛固定24 h，然后进行脱水、常规石蜡包埋、切片。参考文献[9]方法对切片进行Masson-Fontana染色，染色完成后将切片置于显微镜下观察并拍照，对表皮层中的黑色素含量进行多光谱分析定量。

1.3.7 免疫组织化学染色检测皮肤组织中β-catenin、COX-2、MMP-9的蛋白表达

取烘干后的切片，脱蜡复水后用30% H₂O₂处理30 min，经超纯水润洗后，将切片置于0.01 mol·L^-1柠檬酸缓冲液（pH 6.0）中煮沸10 min，再经0.01 mol·L^-1、pH 6.8的PBS冲洗后，血清封闭30 min，滴加抗β-Catenin、COX-2、MMP-9多克隆抗体（稀释比例均为1 ∶ 200）4℃条件下孵育过夜，然后继续二抗孵育40 min，经PBS清洗后将切片浸入装有DAB溶液的染缸中避光发色40 s，水洗终止发色，苏木素中浸染2 min。经超纯水洗、梯度乙醇脱水、二甲苯透明、中性树脂封固后，将切片放置在显微镜下观察蛋白表达情况，并进行多光谱分析定量。

1.4 统计学分析

采用GraphPad Prism 9.0科学统计绘图软件进行分析，以x±s表示，组间和组内采用双向方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 GPCP及各单体膏剂的抗紫外防晒作用

在UVB（280~320 nm）段，GPCPL、乳香膏剂、白芨膏剂、白芨-乳香混合膏剂的A值均高于熊果苷，其中GPCPL和白芨膏剂吸光度值的差异有统计学意义（P＜0.05）；在UVA（320~400 nm）段，GPCPL和白芨膏剂的A值高于熊果苷，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），乳香膏剂和白芨-乳香混合膏剂的A值与熊果苷比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结果见图1。

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  图1 GPCP及各单体膏剂的紫外吸光度值（n=3）

  Figure 1.UV absorbance values of GPCP and various monomer pastes (n=3)

  注：A为各波长下的具体紫外吸光度值；B为各波段下的平均紫外吸光度值；与熊果苷比较，aP<0.05，bP<0.01

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2.2 GPCP中含有抗氧化及酪氨酸酶活性抑制成分

如图2-A和图2-B结果可知：平卧菊三七中的多种活性成分都具有很强的自由基清除活性，其中绿原酸、新绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B的DPPH自由基半清除率浓度分别为（50.6±4.3），（71.6±3.6），（39.3±5.4），（27.9±4.8）μg·mL^-1；对羟基肉桂酸、绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的ABTS自由基半清除率浓度分别为（141.3±20.2），（290.5±13.4），（460.0±42.5），（439.4±18.5）μg·mL^-1。

如图2-C和图2-D结果可知：在100 μg·mL^-1的浓度条件下，绿原酸、对羟基肉桂酸、异绿原酸B的二酚酶抑制率均超过了50%；而单酚酶抑制率超过50%的只有异绿原酸A。

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  图2 GPCP中各主要活性成分的自由基清除率和酪氨酸酶抑制率（n=3）

  Figure 2.Free radical scavenging rate and tyrosinase inhibition rate of main active components

  in GPCP (n=3)

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2.3 GPCP能够改善紫外诱导的黑色素过度沉积及皮肤损伤

通过观察各组皮肤大体变化（图3-A），发现除正常对照组皮肤始终白皙光滑以外，随紫外线照射时间延长，其余组皮肤的颜色和形态均有不同程度改变；给药第1天：模型组皮肤出现点状色斑，并伴有细纹及皮屑，熊果苷组及GPCP低、高剂量组皮肤与正常对照组相似，无明显颜色及形态变化；给药第7天：模型组皮肤颜色加深，有明显色斑沉着，且皮肤部分区域褶皱，熊果苷组及GPCP低、高剂量组皮肤颜色与正常对照组接近，但皮肤表面均有少量皮屑附着；给药第15天：模型组皮肤呈棕褐色，有大量色斑沉着，且皮肤褶皱明显，呈皮革样外观，熊果苷组皮肤有成片色斑沉着，皮肤部分区域褶皱，GPCP低、高剂量组皮肤有少量色斑沉着，皮肤部分区域褶皱。结果表明，不同剂量的GPCP干预均可减少紫外诱导的皮肤色斑沉着，改善紫外线照射引起的皮肤老化损伤，且这种治疗效果在第7天时最明显。

黑色素染色结果显示，黑色素主要分布在表皮基底层和棘层中，染色呈黑色（图3-A）。图3-B皮肤表皮层中的黑色素含量定量分析结果显示：与正常对照组相比，模型组黑色素的含量在第1，7，15天时均显著增高（P＜ 0.01） ；与模型组相比，熊果苷组及GPCP低、高剂量组黑色素的含量均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。

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  图3 不同时间点各组豚鼠皮肤表观图及黑色素染色定性图

  Figure 3.The pictures of skin appearance and qualitative analysis chart of melanin staining for guinea pigs in each group at different time points

  注：A为皮肤表观图（1 cm×1 cm）及黑色素染色图（20×）；B为皮肤表皮层整体黑色素含量定性图（n=9）；与正常对照组比较，aP<0.01；与模型组比较，bP<0.05，cP<0.01；与熊果苷组比较，dP<0.05；与GPCP低剂量组比较，eP<0.05

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2.4 GPCP抑制紫外诱导的β-catenin、COX-2、MMP-9蛋白的高表达

免疫组化染色结果显示，β-catenin主要在表皮胞质和细胞膜上表达，染色呈棕褐色（图4-A）。图4-B的蛋白定量分析结果显示：与正常对照组相比，模型组的β-catenin表达在第1，7，15天时显著上调（P＜0.01）；在给予熊果苷及GPCP干预后，与模型组比较，熊果苷组及GPCP低、高剂量组的β-catenin表达均显著下调（P＜0.05或P＜0.01）。

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  图4 不同时间点各组豚鼠皮肤β-catenin免疫组化染色及定性图

  Figure 4.The pictures of skin β-catenin immunohistochemical staining and qualitative analysis chart of guinea pigs in each group at different time points

  注：A为免疫组化染色图（20×）；B为相对蛋白表达结果（n=9）；与正常对照组比较，aP<0.01；与模型组比较，bP<0.05，cP<0.01；与熊果苷组比较，dP<0.01；与GPCP低剂量组比较，eP<0.05，fP<0.01

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COX-2主要在表皮胞质间表达，染色呈黄色、棕黄色（图5-A）。图5-B的蛋白定量分析结果显示：与正常对照组相比，模型组的COX-2表达在第1，7天时显著上调（P＜0.05或P＜0.01） ；在给予熊果苷及GPCP干预后，与模型组比较，熊果苷组及GPCP低、高剂量组的COX-2表达均显著下调（P＜0.05或P＜0.01）。

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  图5 不同时间点各组豚鼠皮肤COX-2免疫组化染色及定性图

  Figure 5.The pictures of skin COX-2 immunohistochemical staining and qualitative analysis chart of guinea pigs in each group at different time points

  注：A为免疫组化染色图（20×）；B为相对蛋白表达结果（n=9）；与正常对照组比较，aP<0.05，bP<0.01；与模型组比较，cP<0.05，dP<0.01；与熊果苷组比较，eP<0.05，fP<0.01；与GPCP低剂量组比较，gP<0.05

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MMP-9主要在表皮胞质间表达，染色棕黄色、棕褐色（图6-A）。图6-B的蛋白定量分析结果显示：与正常对照组相比，模型组的MMP-9表达在第1，7，15天时显著上调（P＜0.01）；在给予熊果苷及GPCP干预后，与模型组比较，熊果苷组及GPCP低、高剂量组的MMP-9表达均显著下调（P＜0.05或P＜0.01）。

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  图6 不同时间点各组豚鼠皮肤MMP-9染色及定性图

  Figure 6.The pictures of skin MMP-9 staining and qualitative analysis chart of guinea pigs

  in each group at different time points

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3 讨论

紫外线是色斑产生的重要原因之一，其中能穿透大气层对人体造成损伤的紫外线主要是UVA（320~400 nm）和UVB（280~320 nm）[10]。UVA的强穿透性使其几乎可以诱发所有皮肤类型中的即刻色素变黑反应，还能直达表皮底部，导致表皮深层黑色素含量增加，在暴露后的3~5 d发生延迟晒黑反应[11]；UVB的穿透性弱于UVA，其主要诱发皮肤中的延迟晒黑反应，以及在皮肤上形成早期红斑[12]。本研究结果显示，复方制剂中白芨单体的A值最高，这可能是平卧菊三七复方制剂表现出良好紫外吸收效果的关键。杨玲玲等[13]从17种天然植物中筛选出4种具有良好防晒性能的植物，其中就有白芨，这与本研究结果类似。提示平卧菊三七复方制剂外用能降低紫外线对皮肤的伤害，同时防止皮肤中黑色素含量的增加。

人体的正常代谢活动以及紫外线照射都会增加体内活性氧（ROS）的分布[14]，ROS具有极高的反应活性，能参与到大多数的生物学反应中。过量的ROS与多数疾病的产生密切相关，如皮肤老化、炎症反应，甚至皮肤癌等。ROS诱导许多细胞信号通路，从而导致炎症和加速细胞衰老[15]，其通过促进胶原蛋白和蛋白聚糖的降解来破坏真皮基质的结构。ROS还参与了黑色素的合成调控，通过加速二羟基吲哚和吲哚醌之间的反应刺激黑色素生成，从而增加皮肤变黑。本研究通过检测制剂中各单体主要成分的DPPH、ABTS自由基清除能力来验证平卧菊三七复方制剂的抗氧化效果。结果显示平卧菊三七中的多种活性物质，如绿原酸、对羟基肉桂酸等，均表现出较好的自由基清除能力。而Kim等[3]的研究也证实，平卧菊三七中的绿原酸等化合物具有良好的抗氧化活性。提示平卧菊三七复方制剂可能通过降低皮肤组织中ROS的含量，减少黑色素的生成，并维持了皮肤组织的正常结构，这有利于黑色素的代谢排出。

酪氨酸酶是黑色素合成过程中的关键限速酶。在酪氨酸酶的催化作用下，底物酪氨酸被氧化为多巴醌，多巴醌进一步被氧化脱羧形成二羟吲哚后转变为黑色素，期间酪氨酸酶分别表现出单酚酶和二酚酶活性。本研究结果显示，平卧菊三七中的多种活性物质，如绿原酸、异绿原酸A等，对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有较好的抑制效果，这与Liu等[16]的研究结果类似。

动物实验结果表明，涂抹了GPCP的豚鼠，背部皮肤损伤得到改善，表皮层中的黑色素含量也明显减少，黑色素沉积情况得到有效缓解，这进一步证实GPCP有祛斑美白的功效。在本实验中，GPCP下调了β-catenin、COX-2、MMP-9蛋白的表达。已有研究表明，作为Wnt信号传导的关键核调控因子β-catenin参与了黑色素的合成调控，其表达水平的升高能够促进黑色素合成的关键基因小眼畸形转录因子（MITF）的表达，进而促进细胞内黑色素的合成[17]。不仅如此，β-catenin还被证实与上皮组织中促炎性细胞因子的产生密切相关[18]。Kandan等[19]研究证实，紫外线照射可以增加皮肤中COX-2和MMP-9蛋白的生成，而COX-2和MMP-9分别与皮肤炎症损伤和胶原蛋白降解相关。胶原蛋白主要为表皮结构提供支持，其降解会导致皮肤下垂和皱纹，与皮肤炎症一起，两者都会阻碍黑色素从表皮基底层黑色素细胞到角质形成细胞的转移，影响皮肤黑色素的正常代谢，从而导致黑色素沉积，色斑产生。据此推测GPCP可能通过下调COX-2、MMP-9的表达，抑制胶原蛋白的降解，减轻炎症反应，维持皮肤组织的正常结构。与此同时，COX-2/β-catenin炎性通路也被抑制，β-catenin的表达水平也随之降低，使得黑色素的生成减少。此时，因为皮肤结构未被严重破坏，黑色素的正常代谢通道得以维持，已生成的黑色素得以正常排出，所以色斑难以形成，使得GPCP表现出美白祛斑的功效。

综上所述，平卧菊三七复方制剂具有防护紫外线、抗氧化、抑制酪氨酸酶活性的效果，其能够通过抑制皮肤组织中黑色素的生成，减轻皮肤的氧化损伤、炎性损伤，改善色斑部位的皮肤状态，畅通黑色素的正常代谢途径等多个方面来达到防治色斑的目的。其美白祛斑作用明确且潜在药用价值肯定，可定向开发为一款安全可靠的抗衰老、祛斑美白的产品服务大众。

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