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首页 在线期刊 2025年 第29卷,第10期 详情

基于多指标成分定量结合化学计量学的白芍不同部位质量评价

更新时间:2025年10月30日阅读:32次 下载:5次 下载 手机版

作者: 刘晓霞 1, 2 丁青 1, 2 位翠杰 1, 2 冯涌微 1, 2 张芳平 1, 2 何民友 1, 2 张军 1, 2 陈向东 1, 2 李振雨 1, 2

作者单位: 1. 广东一方制药有限公司(广东佛山 528244) 2. 广东省中药配方颗粒企业重点实验室(广东佛山 528244)

关键词: 白芍 不同部位 含量测定 紫外-可见分光光度 超高效液相色谱 分层聚类分析 主成分分析 正交偏最小二乘-判别分析

DOI: 10.12173/j.issn.2097-4922.202505081

基金项目: 佛山市南海区重点领域科技攻关专项(南科﹝2023﹞20号-18);国家工信部产业技术基础公共服务平台项目-中药全产业链质量技术服务平台(2022-230-221)

引用格式: 刘晓霞,丁 青,位翠杰,冯涌微,张芳平,何民友,张 军,陈向东,李振雨 . 基于多指标成分定量结合化学计量学的白芍不同部位质量评价[J]. 药学前沿, 2025, 29(10): 1659-1668. DOI: 10.12173/j.issn.2097-4922.202505081.

LIU Xiaoxia, DING Qing, WEI Cuijie, FENG Yongwei, ZHANG Fangping, HE  Minyou, ZHANG  Jun, CHEN Xiangdong, LI Zhenyu. Quality evaluation of different parts of Radix Paeoniae Alba based on multi-component quantification combined with chemometrics[J]. Yaoxue QianYan Zazhi, 2025, 29(10): 1659-1668. DOI: 10.12173/j.issn.2097-4922.202505081.[Article in Chinese]

摘要| Abstract

目的  建立紫外-可见分光光度法测定白芍不同部位中总鞣质含量,以及超高效液相色谱法(UPLC)同时测定6种成分的含量测定方法。

方法  以没食子酸为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定总鞣质含量。采用UPLC法同时测定白芍不同部位中没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷6种有效成分的含量,以芍药苷为内参物,对比一测多评法(QAMS)与外标法(ESM)的测定结果。运用分层聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对总鞣质和6种有效成分含量进行分析。

结果  白芍不同部位中各成分含量存在差异:总鞣质与6种有效成分总含量从高到低依次为外皮>根茎>主根,而芍药苷含量则为根茎>主根>外皮;QAMS与ESM法测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的含量无显著差异;HCA、PCA与OPLS-DA分析能明显区分白芍的主根、根茎和外皮等不同部位,并通过OPLS-DA确定并筛选出儿茶素、总鞣质和五没食子酰葡萄糖为3个关键差异性标志物。

结论  所建立的方法快速准确、简便高效、专属性强,为科学评价白芍质量提供了可靠依据。

全文| Full-text

白芍为毛茛科植物芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的干燥根,其采收加工方法及功效在《中国药典(2020年版)》中有明确规定:夏、秋季采挖,洗净后去除头尾与细根,经沸水煮制并去外皮(或先去皮再煮),晒干后入药;具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳之效,常用于血虚萎黄、月经不调、自汗盗汗、胁痛腹痛、四肢挛痛及头痛眩晕等证[1]。白芍主产于安徽、浙江、四川等道地产区,分别习称亳白芍、杭白芍与川白芍[2]。

白芍活性成分丰富,主要包括单萜及其苷类 [3-4]、鞣质类[5-6]、黄酮类[7-8]、多糖类[9]、挥发油类[10]等。其中,单萜苷类成分中的芍药苷是现行质量评价的主要指标,具有降血压、镇痛抗炎[11]、保肝[12]、抗抑郁[13]、抗肿瘤等作用;白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)则表现出抗炎、镇痛、抗应激及免疫调节等多种药理活性[14];鞣质类成分亦具有收敛、止血止泻、抑菌、抗病毒、抗肿瘤和抗氧化等功效[15]。

然而,《中国药典(2020年版)》仅以芍药苷作为白芍质量的单一定量指标,难以全面反映其多成分、多功效的整体质量特征。在产地加工过程中,被去除的“头尾”“细根”及“外皮”等非药用部位与药用主根之间是否存在化学成分差异及其潜在价值,目前尚不明确。现有研究多集中于主根和根茎部位[16-17],且质控指标多以芍药苷等单萜苷类成分为主[18-19],对总鞣质等其他类成分的关注较少,尤其缺乏对不同部位(如外皮、根茎与主根)进行多成分系统性比较的研究。

因此,本研究采用紫外-可见分光光度法测定总鞣质含量,并建立超高效液相色谱法(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)同时测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷6 种成分的含量,系统比较白芍药用部位(主根)与非药用部位(根茎、外皮)在化学成分上的差异,结合化学计量学方法进行综合评价,以期为白芍非药用部位的资源化利用及加工工艺优化提供科学依据。

1 材料

1.1 主要仪器

Thermo Vanquish超高效液相色谱仪[赛默飞世尔科技(中国)有限公司];UV-2600紫外分光光度计(日本岛津仪器公司);ME204E万分之一天平和XP26百万分之一天平购自瑞士梅特勒-托利多公司;HWS-28电热恒温水浴锅(上海一恒科技有限公司)。

1.2 主要药品与试剂

芍药苷(批号:110736-201842,纯度97.4%)、没食子酸(批号:110831-201605,纯度90.8%)和儿茶素(批号:110877-201604,纯度97.9%)均购自中国食品药品检定研究院;芍药内酯苷(四川维克奇生物科技有限公司,批号:wkq19041104,纯度98%);苯甲酰芍药苷(成都普菲德生物技术有限公司,批号:19103002,纯度98.30%);五没食子酰葡萄糖(成都曼斯特生物科技有限公司,批号:MUST-16061211,纯度98.33%);10批白芍样品购自浙江省金华市磐安县,根据白芍主根、根茎、外皮特征进行编号,具体见表1;磷酸和乙腈为色谱级,其余试剂均为分析纯,水为超纯水。

  • 表格1 样品信息
    Table 1.Sample information

2 方法与结果

2.1 总鞣质含量测定

2.1.1 对照品溶液的制备

精密称取没食子酸对照品50.154 mg,置100  mL棕色量瓶中,加水制成每1 mL含没食子酸455.398 μg的对照品贮备液;精密移取上述对照品储备液5 mL,置50 mL棕色量瓶中,用水制成每1 mL含没食子酸45.540 μg的对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液的制备

取白芍样品粉末约1.0 g,精密称定,置250  mL棕色量瓶中,加水150 mL放置过夜,超声处理(功率:250 W,频率:40 kHz)10 min,放冷后加水至刻度,摇匀,静置使固体物沉淀,滤过并弃去初滤液50 mL,再精密量取续滤液20  mL置100 mL棕色量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得。

2.1.3 线性关系考察

精密量取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL,分别置25 mL棕色量瓶中,各加入磷钼钨酸试液1 mL,再依次加水11.5、11.0、10.0、9.0、8.0、7.0 mL,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,放置30 min后以相应试剂为空白,按照紫外-可见分光光度法[20]在760 nm波长处测定吸光度,以浓度为横坐标(X,μg/mL)、吸光度为纵坐标(Y)绘制标准曲线,计算得线性回归方程为Y=0.144  5X+0.000 4,r=0.999 9。结果表明,没食子酸在0.911~9.108 μg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.1.4 具体测定方法

精密量取供试品溶液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,按照“2.1.3”项下方法,自“各加入磷钼钨酸试液1 mL”起,加水10 mL,依法测定吸光度,代入标准曲线计算供试品溶液中没食子酸的量,作为总酚量。

精密量取供试品溶液25 mL,置于已盛有0.6  g干酪素的100 mL具塞锥形瓶中,密塞后于30℃水浴中保温1 h并时时振摇;取出放冷,摇匀后滤过,弃去初滤液;再精密量取续滤液2 mL置25 mL棕色量瓶中,按照“2.1.3”项下方法,自“各加入磷钼钨酸试液1 mL”起,加水10 mL,依法测定吸光度,代入标准曲线计算供试品溶液中没食子酸的量,作为不被吸附的多酚量。鞣质含量=总酚量-不被吸附的多酚量。

2.1.5 重复性试验

取白芍主根样品(编号:ZG01)粉末约1.0 g,精密称定,按照“2.1.2”项下方法平行制备6份供试品溶液,并按照“2.1.4”项下方法测定总鞣质含量。结果显示总鞣质平均含量为4.58 mg/g,RSD为1.16%(n=6),表明该分析方法重复性良好。

2.1.6 稳定性试验

取供试品溶液(编号:ZG01)于室温下放置,分别在0、0.5、1、2、3、5 h时间点,按照“2.1.4”项下方法测定吸光度,计算得吸光度的RSD为1.34%(n=6),表明供试品溶液在5 h内稳定性良好。

2.1.7 回收率试验

取主根样品(编号:ZG01)粉末约0.5 g,精密称定,平行6份,加入与样品中含量等量的对照品,按照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液,并按照“2.1.4”项下方法测定总鞣质含量,计算得总鞣质的平均回收率为98.38%,RSD为1.11%(n=6),结果表明加样回收率良好。

2.1.8 样品测定

取30批样品供试品溶液,以没食子酸为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定样品中总鞣质的含量,结果见表2。结果显示,白芍外皮中总鞣质含量最高,根茎次之,主根最低。

  • 表格2 白芍不同部位总鞣质含量测定结果表(mg/g,n=3)
    Table 2.The determination results of total tannins in different parts of Radix Paeoniae Alba (mg/g, n=3)

2.2 一测多评法测定6种有效成分含量

2.2.1 色谱条件

色谱柱:Waters ACQUITY HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);流动相:乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱(0~0.5 min,7%→14% A;0.5~2.5 min,14% A;2.5~4 min,14%→16% A;4~6 min,16%→23% A;6~8 min,23%→36% A;8~15 min,36%→50% A);流速:0.40 mL/min;柱温:30℃;检测波长:230 nm;进样量:1 μL。

2.2.2 对照品溶液的制备

分别精密称取对照品没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖适量,加甲醇制成每1 mL各含80 μg的溶液,即得。

2.2.3 供试品溶液的制备

取白芍样品粉末约0.4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50 mL,称定重量,加热回流30 min,取出,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2.2.4 系统适用性试验

精密吸取主根供试品溶液(编号:ZG01)、对照品溶液与空白溶剂,按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图(图1)。结果显示空白溶剂对6种有效成分含量测定无干扰,表明该方法专属性良好。

  • 图1 UPLC色谱图
    Figure 1.The UPLC chromatogram
    注:A. 空白溶剂;B. 混合对照品溶液;C. 供试品溶液;1. 没食子酸;2.  儿茶素;3. 芍药内酯苷;4. 芍药苷;5. 五没食子酰葡萄糖;6. 苯甲酰芍药苷。

2.2.5 线性关系考察

取对照品没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含没食子酸409.145 μg、儿茶素306.721 μg、芍药内酯苷498.722 μg、芍药苷549.531 μg、苯甲酰芍药苷419.250 μg、五没食子酰葡萄糖405.415 μg的混合对照品溶液。精密吸取上述混合对照品溶液0.5、1、1、2、3 mL,分别置50、25、5、5、5 mL量瓶中,依次稀释至不同浓度的线性混合对照品溶液。按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定,以对照品浓度为横坐标(X,μg/mL)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,所得标准曲线以及线性范围见表3。结果表明,这6种有效成分在各自浓度范围内的线性关系良好。

  • 表格3 6种有效成分线性考察结果
    Table 3.Results of linear investigation results of 6 active ingredients

2.2.6 精密度试验

精密吸取“2.2.2”项下对照品溶液,按照“2.2.1”项下色谱条件重复进样6次。计算得没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖峰面积的RSD分别为0.41%、0.33%、0.29%、0.37%、0.75%、0.58%(n=6),结果表明仪器精密度良好。

2.2.7 重复性试验

取主根样品(编号:ZG01)粉末约0.4 g,按照“2.2.3”项下方法平行制备6份供试品溶液,并按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定。计算得没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖的平均含量为0.95、0.82、8.91、28.33、0.88、6.05 mg/g,RSD分别为1.74%、1.81%、0.63%、0.77%、1.85%、1.76%(n=6),结果表明该方法重复性良好。

2.2.8 稳定性试验

取主根供试品溶液(编号:ZG01)于室温下放置,分别在0、2、9、16、22、24 h时间点取样,按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定,计算得没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖峰面积的RSD分别为0.70%、0.54%、0.97%、1.09%、1.95%、1.25%(n=6),结果表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.2.9 回收率试验

取已知含量的主根样品(编号:ZG01)粉末约0.2 g,精密称定,平行6份,加入与样品中含量等量的对照品,按照“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,并按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定,计算得没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖的平均回收率分别为93.02%、93.35%、96.57%、97.62%、98.74%、98.09%,RSD分别为1.95%、1.77%、1.90%、1.05%、1.01%、2.29%(n=6),结果表明该方法回收率良好。

2.2.10 相对校正因子计算

以芍药苷为内标物,按照公式fsi=fs/fi=(Cs×Ai)/(Ci×As)计算相对校正因子,其中As和Cs分别为内标物芍药苷的峰面积和浓度,Ai和Ci为待测成分的峰面积和浓度。根据“2.2.5”项下线性考察所得的各对照品浓度及对应峰面积,计算得芍药苷与没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖及苯甲酰芍药苷的平均相对校正因子分别为0.65、0.42、1.02、 0.62、0.64,RSD分别为0.96%、2.61%、1.84%、0.54%、1.17%(n=6)。

2.2.11 耐用性考察

(1)流速。以芍药苷为参照,分别在0.38、0.40、0.42  mL/ min的流速下测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的相对保留时间与相对校正因子,结果见表4。各成分相对保留时间的RSD分别为0.45%、0.28%、0.20%、0.04%、0.06%(n=6),相对校正因子的RSD分别为0.71%、0.48%、0.30%、0.39%、0.65%(n=6),说明不同流速对上述5种成分的相对保留时间及相对校正因子均无显著影响。

  • 表格4 不同流速对相对保留时间与相对校正因子的影响(n=2)
    Table 4.The influence of different flow rates on relative retention time and relative correction factor (n=2)

(2)柱温。以芍药苷为参照,分别在28、30、32℃的柱温下测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的相对保留时间与相对校正因子,结果见表5。各成分相对保留时间的RSD分别为1.15%、0.49%、0.18%、0.19%、0.37%(n=6),相对校正因子的RSD分别为1.96%、1.61%、0.55%、1.06%、1.25%(n=6),说明不同柱温对上述5种成分的相对保留时间及相对校正因子均无显著影响。

  • 表格5 不同柱温对相对保留时间与相对校正因子的影响(n=2)
    Table 5.The influence of different column temperatures on relative retention time and relative correction factor (n=2)

(3)仪器。以芍药苷为参照,分别采用不同仪器测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的相对保留时间与相对校正因子,结果见表6。各成分相对保留时间的RSD分别为1.44%、0.46%、0.52%、0.85%、0.13%(n=6),相对校正因子的RSD分别为0.41%、0.73%、0.43%、1.01%、0.52%(n=6),说明不同仪器对上述5种成分的相对保留时间及相对校正因子均无显著影响。

  • 表格6 不同仪器对相对保留时间与相对校正因子的影响(n=2)
    Table 6.The influence of different instruments on relative retention time and relative correction factor (n=2)

2.2.12 色谱峰定位

取上述不同仪器、不同流速和不同柱温的相对保留时间均值,确定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的相对保留时间分别为0.26、0.63、0.87、1.51和1.99。

2.2.13 白芍不同部位含量测定结果

取30批白芍样品,按照“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,并按照“2.2.1”项下色谱条件进样测定,以芍药苷为参照,分别采用外标法(external standard method,EMS)和一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)计算没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的含量,并比较两种计算方式的相对偏差,结果见表7。结果显示,白芍植株中不同部位主根、根茎和外皮的6种有效成分含量测定结果存在一定差异,以芍药苷和6种药效成分总量为评价指标,芍药苷含量由高到低顺序为根茎>主根>外皮;6种有效成分总含量由高到低顺序为外皮>根茎>主根。两种方法测定的没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的含量相对偏差均小于5.0%,说明两种方法计算结果无显著差异,QAMS准确度良好。

  • 表格7 白芍不同部位含量测定结果表(mg/g,n=3)
    Table 7.Table of the content determination results of different parts of Radix Paeoniae Alba(mg/g, n=3)

2.3 化学计量学分析

2.3.1 分层聚类分析

以QAMS法测定的30批样品中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷及总鞣质的含量作为变量,导入SPSS 20.0软件进行数据分析;采用Z得分法对各成分含量进行标准化处理,以平方Euclidean距离表征样本间距,运用组间联接法对30批样品进行分层聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA),结果见图2。结果显示,当组间联接距离介于5~12之间时,30批样品可被分为3类:第1类(ZG01~ZG10)对应主根部位,第2类(GJ01~GJ10)对应根茎部位,第3类(WP01~WP10)对应外皮部位。该结果表明,HCA能够明显区分白芍的不同药用部位。

  • 图2 HCA图
    Figure 2.HCA diagram

2.3.2 主成分分析

运用SPSS 20.0软件,以QAMS法测定的30批样品中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷及总鞣质的含量为变量进行因子分析,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)得到相关矩阵的特征值及其方差贡献率(表8和图3)。分析显示,前两个主成分的特征值分别为4.591和1.634,累计方差贡献率达88.923%。由因子载荷矩阵(表9)可知,没食子酸与芍药内酯苷在主成分1上具有较高载荷,而儿茶素在主成分2上载荷较高。进一步以降维后得到的两个主成分得分作为X轴与Y轴,绘制30批样品的散点分布图(图4),结果显示白芍的主根、根茎及外皮3个部位的样品能较好区分,同类样品聚集于同一区域,表明不同部位间的化学成分存在明显差异。对主成分得分的分析(表10)发现:主根样品的主成分1得分均为正值,主成分2得分均为负值;外皮样品的得分特征与主根完全相反;而根茎样品在两个主成分上的得分则均为正值。

  • 表格8 特征值及各主成分的贡献率
    Table 8.Contribution rate of characteristic roots and principal components

  • 图3 主成分分析碎石图
    Figure 3.PCA gravel chart

  • 表格9 主成分因子载荷矩阵
    Table 9.Principal component factor load matrix

  • 图4 主成分得分分布图
    Figure 4.Score plot of principal components

  • 表格10 主成分得分
    Table 10.Principal component score

2.3.3 正交偏最小二乘-判别分析

采用SIMCA 14.1软件,以QAMS法测定的30批样品中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷及总鞣质含量为变量,进行正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)。通过对模型数据进行200次随机排列并进行置换检验(图5),结果显示左侧的R2(模型对X和Y矩阵的解释率)和Q2(预测能力)均小于右侧原始值,表明所建OPLS-DA模型未出现过拟合。该模型的参数为R2X=0.889,R2Y=0.918,Q2=0.902(>0.5),说明模型有效,可用于白芍不同部位的模式识别。Scores图(图6)表明白芍不同部位样品明显分为3类;结合变量投影重要性(variable importance in projection,VIP)结果(图7),以VIP>1.0为筛选标准,共识别出3个差异标志物,按VIP值排序依次为儿茶素>总鞣质>五没食子酰葡萄糖,表明这些成分在区分白芍不同部位中贡献显著。

  • 图5 模型置换检验图
    Figure 5.Model permutation test diagram

  • 图6 OPLS-DA得分图
    Figure 6.Chart of OPLS-DA score

  • 图7 差异性标志物VIP图
    Figure 7.VIP map of different markers

3 讨论

本研究采用冷浸过夜超声提取法测定总鞣质含量,该方法操作简便,可有效避免鞣质因热敏性和易氧化造成的结构破坏,实现较完全提取[21]。结果显示,白芍外皮中总鞣质含量最高,根茎次之,主根最低。在建立QAMS法测定6种有效成分含量时,前期通过单因素分析比较了不同提取溶剂、提取方式及提取时间的影响,最终确定以稀乙醇50  mL加热回流30 min为供试品溶液制备方法,该条件下各成分峰面积较大、提取效率较高。

白芍作为我国传统药材,应用历史悠久,本研究采用UPLC法,以芍药苷为内参物,建立QAMS法同时测定其不同部位中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷的含量,方法学验证结果显示该方法与EMS法测定结果无显著差异,可信度良好。含量测定结果表明,不同部位中6种有效成分含量存在差异:芍药苷含量顺序为根茎>主根>外皮,与文献[16-17]报道一致;而6种成分总量则为外皮>根茎>主根,主要因外皮中儿茶素与芍药内酯苷含量较高,该趋势亦与已有研究[11-12]相符。值得注意的是,《中国药典(2020年版)》[1]规定白芍加工须“去皮”,然而本研究中外皮部位多种成分含量较高,提示该传统加工方式的合理性值得进一步探讨。

在化学计量学分析方面,以总鞣质及6种成分含量为变量进行HCA、PCA及OPLS-DA,结果显示三者均能有效区分白芍的主根、根茎与外皮部位,说明各部位化学成分组成相似但含量差异显著。PCA分析中,没食子酸、芍药内酯苷和儿茶素是对区分贡献较大的成分;OPLS-DA则进一步识别出儿茶素、总鞣质和五没食子酰葡萄糖为关键差异标志物。主成分得分亦呈现规律分布:主根样品主成分1得分为正、成分2为负;外皮则相反;根茎两类成分得分均为正。

综上所述,本研究表明白芍不同部位间化学成分存在显著差异,化学计量学方法可有效用于其区分与质量评价。尽管在主根、根茎和外皮形态完整时易于鉴别,但在现代制药过程中,药材常经粉碎、提取等处理而失去原有形态,此时本研究建立的基于多指标成分与化学模式识别的方法,可为中间体来源一致性与化学均一性控制提供实用工具。需指出的是,本研究样本主要来源于杭白芍,后续应进一步扩大样本量,涵盖亳白芍、川白芍等不同产地、生长年限及加工批次,以全面评估白芍部位差异的普遍性与适用性。

参考文献| References

1.中国药典2020年版. 一部[S]. 2020: 108-109.

2.周学刚. 白芍种质资源的初步评价及传粉生物学研究[D]. 北京: 中国协和医科大学, 2009. https://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10023-2010015754.htm.

3.杨爽, 杜倩倩, 岳倩侠, 等. 基于UPLC-Q-TOF-MS和HPLC的不同品种白芍主要化学成分分析[J]. 中国中药杂志, 2023, 48(3): 715-724. [Yang S, Du QQ, Yue QX, et al. Analysis and evaluation on Paeoniae Radix Alba from different cultivars by UPLC-Q-TOF-MS and HPLC[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(3): 715-724. DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm. 20220618.201.

4.刘杰, 陈琳, 范彩荣, 等. 基于HPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的白芍和赤芍主要成分定性定量研究[J]. 中国中药杂志, 2015, 40(9): 1762-1770. [Liu J, Chen L, Fan CR, et al. Qualitative and quantitative analysis of major constituents of Paeoniae Radix Alba and Paeoniae Radix Rubra by HPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2015, 40(9): 1762-1770.] DOI: 10.4268/cjcmm20150926.

5.李秋晗, 张喜武, 闫广利, 等. 基于UPLC-Q-TOF-MSE结合多元统计方法的不同产地白芍药材质量评价[J]. 中草药, 2023, 54(7): 2243-2253. [Li QH, Zhang XW, Yan GL, et al. Quality evaluation of Paeoniae Radix Alba from different habitats based on UPLC-Q-TOF-MSE combined with multivariate statistical method[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2023, 54(7): 2243-2253.] DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2023.07.025.

6.叶先文, 夏澜婷, 任洪民, 等. 白芍炮制的历史沿革及化学成分、药理作用研究进展[J]. 中草药, 2020, 51(7): 1951-1969. [Ye XW, Xia LT, Ren HM, et al. Research progress on processing history evolution, chemical constituents and pharmacological action of Paeoniae Radix Alba[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2020, 51(7): 1951-1969.] DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020. 07.032.

7.刘程程, 廖莉玲. 白芍抗氧化成分的测定[J]. 广州化工, 2016, 44(23): 81-83. [Liu CC, Liao LL. Determination of contents of main antioxidant compositions in Radix Paeoniae Alba[J]. Guangzhou Chemical Industry, 2016, 44(23): 81-83.] DOI: 10.3969/j.issn.1001-9677.2016.23.030.

8.吴玲芳, 王晓晴, 陈香茗, 等. 白芍化学成分及药理作用研究进展[J]. 国际药学研究杂志, 2020, 47(3): 175-187. [Wu LF, Wang XQ, Chen XM, et al. Chemical constituents and pharmacological activities of Radix Paeoniae Alba: research advances[J]. Journal of International Pharmaceutical Research, 2020, 47(3): 175-187.] DOI: 10.13220/j.cnki.jipr.2020.03.003.

9.秦亚东, 汪荣斌, 周娟娟, 等. 白芍多糖中单糖的组成分析[J]. 中药材, 2015, 38(11): 2335-2338. [Qin YD, Wang RB, Zhou JJ, et al. Analysis of monosaccharide compositions in Paeoniae Radix Alba polysaccharide[J]. Journal of Chinese Medicinal Materials, 2015, 38(11): 2335-2338.] DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2015.11.025.

10.赵朕雄, 冯茹, 符洁, 等. GC-MS联用法分析不同产地白芍和赤芍挥发油成分[J]. 药物分析杂志, 2015, 35(4): 627-634. [Zhao ZX, Feng R, Fu J, et al. Analysis of the volatile components from different origins of Radix Paeoniae Alba and Radix Paeoniae Alba by GC-MS[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2015, 35(4): 627-634.] DOI: 10.16155/j.0254-1793.2015.04.010.

11.代倩倩, 夏欢, 夏桂阳, 等. 白芍方药以及白芍总苷镇痛功效及其机理研究进展[J]. 世界科学技术-中医药现代化, 2020, 22(1): 39-46. [Dai QQ, Xia H, Xia GY, et al. Research progress on analgesic effect and mechanism of Radix Paeoniae Alba decotion and total glucosides of Paeony[J]. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine, 2020, 22(1): 39-46.] DOI: 10.11842/wst.20200210002.

12.姜卫星, 索成云, 王亚博. 白芍总苷调节RhoA/ROCK1信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响[J]. 现代药物与临床, 2024, 39(6): 1375-1383. [Jiang WX, Suo CY, Wang YB. Effect of total glucosides of Paeony on hepatic ischemia-reperfusion injury in rats by regulating RhoA/ROCK1 signaling pathway[J]. Drugs & Clinic, 2024, 39(6): 1375-1383.] DOI: 10.7501/j.issn.1674-5515.2024.06.002.

13.郑大华, 于猛, 金朝, 等. 白芍抗抑郁组分及其化学成分的鉴定 [J]. 药学学报, 2023, 58(5): 1307-1316. [Zheng DH, Yu  M, Jin  Z, et al. Identification of the antidepressant fraction and its major chemical constituents of Radix Paeoniae Alba[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2023, 58(5): 1307-1316.] DOI: 10.16438/j.0513-4870.2022-1165.

14.郑琳颖, 潘竞锵, 吕俊华, 等. 白芍总苷药理作用研究[J]. 广州医药, 2011, 4(23): 66-69. [Zheng Lyu, Pan JQ, Lyu JH, et al. Pharmacological effects of total glycosides of Paeony[J]. Guangzhou Medical Journal, 2011, 4(23): 66-69.] DOI: 10.3969/j.issn.1000-8535.2011.03.034.

15.刘卫华. 谈中药鞣质成分在临床中的应用[J]. 黑龙江中医药, 2005, 4: 55-56. [Liu WH. Discussing the clinical application of tannins in traditional Chinese medicine[J]. Heilongjiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2005, 4: 55-56.] DOI: CNKI:SUN:HLZY.0.2005-04-043.

16.吴雄壮, 王美芳, 杨思沅, 等. 不同部位和不同生长年限白芍中的芍药苷含量测定[J]. 中国现代应用药学杂志, 2006, 23(4): 291-293. [Wu XZ, Wang MF, Yang SY, et al. Determine the content of paeoniflorin which in the different parts and in the different growth apprenticeships in Radix Paeoniae Alba[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2006, 23(4): 291-293.] DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2006.04.012.

17.周学刚, 陈淑欣, 魏东华, 等. 不同种质和不同部位白芍原植物中芍药苷和芍药内酯苷的含量测定[J]. 医学报道, 2011, 30(11): 1477-1480. [Zhou XG, Chen SX, Wei DH, et al. Determination of paeoniflorin and albiflorin in different germplasms and parts of Peony root[J]. Herald of Medicine, 2011, 30(11): 1477-1480.] DOI: 10.3870/yydb.2011.11.029.

18.何倩倩, 刘旭, 孙笑奇, 等. 基于白芍饮片含量测定探讨临床用药质量控制[J]. 亚太传统医药, 2024, 20(2): 35-39. [He  QQ, Liu X, Sun XQ, et al. Discussion on quality control of clinical medication based on content determination of Paeoniae Radix Alba decoction pieces[J]. Asia-Pacific Traditional Medicine, 2024, 20(2): 35-39.] DOI: 10.11954/ytctyy.202402009.

19.李霓冰, 邓青, 谭苑芬. 不同产地白芍的成分的含量测定及质量评价[J]. 实用中医内科杂志, 2023, 37(8): 133-135. [Li  NB, Deng Q, Tan YF. Determination and quality evaluation of the components in Radix Paeoniae Alba from different habitats[J]. Journal of Practical Traditional Chinese Internal Medicine, 2023, 37(8): 133-135.] DOI: 10.13729/j.issn.1671-7813.Z20222815.

20.中国药典2020年版. 四部[S]. 2020: 39-40.

21.郭东艳, 师延琼, 王幸, 等. 大黄不同炮制品中鞣质含量的测定 [J]. 现代中医药, 2012, 32(4): 76-78. [Guo DY, Shi  YQ, Wang X, et al. Determination of tannins content in different processed products of Rheum palmatum[J]. Modern Traditional Chinese Medicine, 2012, 32(4): 76-78.] DOI: 10.13424/j.cnki.mtcm.2012.04.03.