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目的 基于白芍的主要成分，结合层次分析法-熵权法复合评价，优选建昌帮酒润蜜糠炒白芍炮制工艺。
方法 以芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、水溶性浸出物及醇溶性浸出物含量的综合评分为指标，采用单因素试验和Box-Behnken响应面法，考察黄酒用量、炒制时间、炒制温度、蜜糠用量对白芍炮制工艺的影响，筛选出最佳工艺参数。
结果 酒润蜜糠炒白芍最佳炮制工艺为：黄酒用量15%、炒制时间10 min、炒制温度170 ℃、蜜糠用量40%，验证结果与预测结果吻合。
结论 优选的白芍炮制工艺稳定可行，可为白芍炮制及相关研究提供参考依据。
白芍为毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根，首载于《神农本草经》[1]。其具有养血调经、敛阴止汗等功效，常用于血虚萎黄、月经不调等证[2]。在白芍众多炮制品中，炒白芍和酒白芍被《中国药典（2025年版）》 [2]收录。酒润蜜糠炒白芍是江西建昌帮的特色炮制品种，该法以黄酒和蜜糠为辅料，通过炮制缓和生白芍的酸收寒凉之性，增强其入肝补血的功效[3-4]。在建昌帮酒润蜜糠炒白芍中，黄酒既是辅料，也是“引经药”，具有活血通络的作用，可促进药物成分吸收转运，引导药效精准作用于肝经，并防止白芍养血时出现瘀滞，形成“酒引药入肝、药养血酒活血”的协同效应。蜜糠由炼蜜与谷糠制成，炼蜜可缓和酒的燥烈之性，谷糠能让饮片受热均匀，二者与酒和白芍相协同，使药效更集中于“入肝补血”。然而，目前建昌帮酒润蜜糠炒白芍的炮制工艺缺乏可量化的评价指标，成品色泽等判断多依赖经验，具有一定主观性。因此，本研究以黄酒用量、炒制温度、炒制时间和蜜糠用量为考察因素，采用层次分析法（analytic hierarchy process，AHP）-熵权法结合Box-Behnken设计-响应面法，优选最佳炮制工艺参数，以期为白芍炮制工艺的标准化及临床应用提供科学依据和技术支撑。
1 材料
1.1 主要仪器
1260型安捷伦高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；FA1004N型万分之一分析天平（上海精密仪器有限公司）；KQ-500E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；111B型二两装高速中药粉碎机（瑞安市永利制药机械有限公司）；HH-6型数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）。
1.2 主要药品与试剂
白芍药材均购自安徽亳州药材市场，经江西中医药大学中药鉴定室刘应蛟副教授鉴定为毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根，产地及批号信息见表1；对照品芍药苷（批号：WKQ-0000506）、芍药内酯苷（批号：WKQ-0000507）、羟基芍药苷（批号：WKQ-0000639）均购自四川省维克奇生物科技有限公司，纯度均≥98%；黄酒（浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司，酒精度：16.5%）；谷糠（江西圣田实业有限公司，批号：211213）；炼蜜（上海冠生园蜂制品有限公司，批号：153204X22）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1 炮制方法
蜜糠制备[5]：取定量炼蜜与沸水倒入容器内，搅拌至完全溶解，即得蜜水溶液；将净糠于90 ℃锅中炒热后，淋入蜜水溶液，迅速拌匀，持续翻炒120 s，即得蜜糠。辅料用量为每100 kg净糠用炼蜜20 kg、沸水4 kg。
酒润蜜糠炒白芍[6]：取干燥生白芍薄片置于容器中，按白芍每100 kg用黄酒10 kg的比例，喷淋黄酒并拌匀，待黄酒吸尽后，取出摊晾4 h至干；取预制蜜糠（白芍与蜜糠重量比为2 ∶ 1）置热锅内，武火加热至冒烟，将蜜糠平铺于锅底并推至四周；立即倒入白芍片，将四周蜜糠覆盖于白芍上，盖上锅盖密闭10 s，随后迅速揭开锅盖，快速翻炒至饮片呈淡黄色，立即出锅，筛去蜜糠与灰屑，放入洁净容器中。
2.2 芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷的含量测定方法
2.2.1 HPLC色谱条件
色谱柱：Waters SunFire C18柱（250 mm× 4.6 mm，5 µm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（15 ∶ 85）；流速：1.0 mL/min；检测波长：230 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL[2]。
2.2.2 混合对照品溶液的配制
精密称取对照品芍药苷6.41 mg、芍药内酯苷3.12 mg、羟基芍药苷2.12 mg，置于同一10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成浓度分别为0.641、0.312、0.212 mg/mL的混合对照品溶液。
2.2.3 供试品溶液的配制
取白芍药材粉碎，过三号筛，精密称取粉末0.5 g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25 mL，超声（功率：240 W，频率：45 kHz）处理30 min，放冷，补足减失的重量，摇匀，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
2.2.4 系统适用性试验
取空白溶剂（甲醇）、混合对照品溶液及供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件分别进样测定，记录色谱图（图1）。结果显示，空白溶剂在目标峰位置无干扰；供试品中芍药苷、芍药内酯苷及羟基芍药苷的色谱峰峰形良好，与相邻色谱峰分离度符合要求，表明该方法专属性良好，能够满足含量测定需要。
2.2.5 线性关系考察
精密吸取“2.2.2”项下的混合对照品溶液5、2、1、0.5 mL，分别置于4个10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；再另取“2.2.2”项下的对照品溶液适量，得到5份不同质量浓度的对照品溶液。按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录各成分的峰面积。分别以芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷的质量浓度（X，mg/mL）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归分析。结果显示各成分在测定浓度范围内线性关系良好，具体见表2。
2.2.6 精密度试验
取“2.2.2”项下的混合对照品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录各成分的峰面积，计算得芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷峰面积的RSD分别为0.78%、0.87%、1.76%（n=6），结果表明仪器精密度良好。
2.2.7 稳定性试验
精密吸取“2.2.3”项下供试品溶液（批号：20240612），室温下放置0、2、4、6、8、10、12 h后按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录各成分的峰面积，计算得芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷峰面积的RSD分别为1.27%、0.88%、0.99%（n=7），结果表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。
2.2.8 重复性试验
精密称取同一样品（批号：20240817），按“2.2.3”项下方法平行制备6份供试品溶液，并按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录各成分的峰面积，计算得芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷的平均含量分别为16.32、8.30、7.65 mg/g，RSD分别为0.99%、1.87%、1.16%（n=6），结果表明该方法重复性良好。
2.2.9 加样回收率试验
精密称取已知含量（芍药苷16.32 mg/g、芍药内酯苷8.30 mg/g、羟基芍药苷7.65 mg/g）的白芍样品（批号：20240817）6份，每份0.25 g。分别精密加入与样品中含量相当的对照品（芍药苷4.08 mg、芍药内酯苷2.08 mg、羟基芍药苷1.92 mg），按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录各成分的峰面积，计算得芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷的平均加样回收率分别为100.30%、100.59%、99.66%，RSD分别为1.97%、2.14%、1.57%（n=6），结果表明该方法准确度良好。
2.3 浸出物的含量测定
水溶性浸出物的测定参照《中国药典（2025年版）》四部通则2201浸出物测定法中水溶性浸出物热浸法[7]进行：取白芍粉末约2 g，置100 mL锥形瓶中，加水50 mL，密塞，称重，静置1 h后，加热回流1 h。放冷后，称重，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取滤液25 mL，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，称重。
醇溶性浸出物的测定参照文献[8]方法进行：取白芍粉末约2 g，置100 mL锥形瓶中，加40%乙醇50 mL，密塞，称重，静置1 h后，加热回流1 h。放冷后，称重，用40%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取滤液25 mL，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，称重。
2.4 权重系数确定
2.4.1 AHP
本研究选取芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷含量以及水溶性浸出物、醇溶性浸出物得率作为评价指标。依据《中国药典（2025年版）》[2]对白芍中芍药苷含量（不得少于1.2%）的要求，并结合药效重要性，确定各指标重要性顺序为：芍药苷含量＞芍药内酯苷含量＞羟基芍药苷含量 ＞水溶性浸出物得率=醇溶性浸出物得率。
采用SPSSPRO软件构建AHP模型，以综合评分为决策目标，5项指标为方案层，建立优先判断矩阵，计算得到各指标权重系数依次为：芍药苷含量41.288、芍药内酯苷含量25.709、羟基芍药苷含量15.387、水溶性浸出物含量8.808、醇溶性浸出物含量8.808。经一致性检验，一致性指标（consistency index，CI）=0.009，一致性比率（consistency ratio，CR）=0.008（CI≠0，CR ＜0.1），表明判断矩阵一致性良好，权重系数有效，可用于后续指标赋权。具体见表3。
2.4.2 熵权法
熵权法根据各指标离散程度来衡量综合指标的影响程度，属于客观赋权法，信息量越大，熵越小，表明对评价的贡献越大，权重即越大[9]。参照文献[10]方法，计算信息熵及指标的权重系数，具体见表4。
2.4.3 AHP-熵权法组合赋权法
采用主观赋权法（AHP）与客观赋权法（熵权法）相结合的方式计算各指标权重[9]，最终确定芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、水溶性浸出物及醇溶性浸出物的综合权重分别为0.369 3、0.183 7、0.263 3、0.078 8和0.104 9。
2.5 单因素试验
2.5.1 黄酒用量
取同一批次、大小均匀的白芍饮片5份，分别加入相当于白芍饮片质量2.5%、5%、10%、15%、20%的黄酒，并在炒制时间8 min、炒制温度150 ℃、蜜糠用量50%的条件下进行炮制。结果显示，当黄酒用量为15%时，所得炮制品的综合评分最高，因此后续试验以15%为中心，采用Box-Behnken设计-响应面法，将黄酒用量选择范围确定为10%~20%进行进一步优化。结果见图2。
2.5.2 炒制时间
称取同一批次、大小均匀的白芍饮片5份，在固定黄酒用量15%、蜜糠用量50%、炒制温度150 ℃的条件下，分别炒制4、6、8、10、12 min。结果表明，当炒制时间为10 min时，所得炮制品的综合评分最高，因此后续试验以10 min为中心，采用Box-Behnken设计-响应面法，将炒制时间选择范围确定为8~12 min进行进一步优化。结果见图3。
2.5.3 炒制温度
称取同一批次、大小均匀的白芍饮片5份，在固定黄酒用量15%、蜜糠用量50%、炒制时间10 min的条件下，分别于140、150、160、170、180 ℃的温度下进行炒制。结果表明，当炒制温度为170 ℃时，所得炮制品的综合评分最高，因此后续试验以170 ℃为中心，采用Box-Behnken设计-响应面法，将炒制温度选择范围确定为160~180 ℃进行进一步优化。结果见图4。
2.5.4 蜜糠用量
取同一批次、大小均匀的白芍饮片5份，在固定黄酒用量15%、炒制时间10 min、炒制温度170 ℃的条件下，分别加入相当于白芍饮片质量10%、20%、30%、40%、50%的蜜糠进行炮制。结果显示，当蜜糠用量为40%时，所得炮制品的综合评分最高，因此后续试验以40%为中心，采用Box-Behnken设计-响应面法，将蜜糠用量选择范围确定为30%~50%进行进一步优化。结果见图5。
2.6 Box-Behnken设计-响应面试验
2.6.1 试验设计与结果
在单因素试验结果基础上，以黄酒用量（A）、炒制时间（B）、炒制温度（C）、蜜糠用量（D）为考察因素，采用Box-Behnken设计-响应面法，并运用Design Expert 13软件进行分析。各因素及水平设计见表5，试验方案及结果见表6。
2.6.2 模型拟合与方差分析
以综合评分为响应值导入Design Expert 13进行分析。经回归拟合后，得到综合评分与各因素的回归方程：综合评分=0.9612-0.0070A+0.0234B+0.0129C-0.0046D-0.0048AB-0.0118AC-0.0028AD+0.0446BC+ 0.0233BD+0.0306CD-0.0775A2-0.0540B2-0.0674C2-0.0550D2，该模型P＜0.000 1，失拟项P＞0.05，决定系数R2=0.940 5，变异系数=2.40%，说明模型具有较好的拟合优度与预测能力，可用于酒润蜜糠炒白芍炮制工艺的优化分析（表7）。影响因素分析显示，因素B（炒制时间）与因素C（炒制温度）对综合评分有显著影响，而因素A（黄酒用量）和因素D（蜜糠用量）的影响不显著。各因素对综合评分的影响程度依次为：炒制时间＞炒制温度＞黄酒用量＞蜜糠用量。在二项式中，A2、B2、C2、D2均表现出极显著影响，且F值较高。
2.6.3 响应面结果分析
采用Design Expert 13软件绘制等高线图与三维响应曲面图，见图6。一般而言，响应曲面越陡峭、等高线形状越接近椭圆形，表明对应两因素间的交互作用对响应值影响越明显，交互作用也越显著[11]。结合图6与方差分析结果可知，炒制时间（B）与炒制温度（C）所对应的响应曲面最为陡峭，其等高线也最接近椭圆形，说明二者交互作用对白芍炮制工艺影响最为显著。根据回归模型预测，酒润蜜糠炒白芍的最佳工艺参数为：黄酒用量17.831%、炒制时间10.514 min、炒制温度171.401 ℃、蜜糠用量40.372%。结合实际生产操作可行性，最终确定最佳炮制工艺为：黄酒用量15%、炒制时间10 min、炒制温度170 ℃、蜜糠用量40%。
2.6.4 工艺验证
按最佳炮制工艺进行3次平行试验，结果显示，平均综合评分为0.971 8，RSD为1.15%（n=3），与模型预测值（0.935 0）较为接近，表明模型预测性良好，工艺稳定可靠。
2.7 含量测定
对10批白芍炮制前后的成分进行含量测定。结果显示，白芍生品（编号：S1~10）中芍药苷含量为1.270 6%~2.181 6%，芍药内酯苷为0.184 4%~1.001 8%，羟基芍药苷为0.108 6%~ 1.108 4%，水溶性浸出物为22.44%~25.50%，醇溶性浸出物为22.64%~28.18%。酒润蜜糠炒白芍（编号：J1~10）中芍药苷含量为1.383 2~ 2.569 6%，芍药内酯苷为0.408 9%~1.210 8%，羟基芍药苷为0.098 2%~ 1.217 2%，水溶性浸出物为23.44%~26.31%，醇溶性浸出物为25.10%~31.12%。结果表明，炮制后芍药苷与芍药内酯苷含量明显升高；羟基芍药苷变化不大，个别样品略有下降，整体保持稳定；水溶性浸出物略有提升且基本稳定；醇溶性浸出物则显著升高。具体见表8。
3 讨论
AHP是一种将定性评价与定量分析相结合的科学决策方法。该方法通过量化处理主观定性指标，并依赖决策者的经验对各评价指标的重要性进行比较和判断[12]。Box-Behnken响应面法是中药炮制工艺优选试验中常用的方法，通过多项式拟合建立非线性模型以预测最佳工艺，具有较高的准确性[13]。熵权法侧重于客观信息确定权重，而AHP主要依赖于主观经验进行权重分配，二者结合可使检测指标的评估更为全面，结果更加科学合理[14]。
以芍药苷和芍药内酯苷为代表的单萜及其苷类成分是白芍中公认的药效物质[15]。白芍中的芍药苷和芍药内酯苷能够保护肝细胞免受损伤，减轻肝纤维化和脂肪肝症状，还能够调节神经递质水平，改善抑郁症状；羟基芍药苷具有调节免疫系统功能，能增强机体免疫力[16]。
浸出物得率作为综合性辅助指标，能够较全面地反映炮制工艺的整体效果，并体现中医药“整体观”的特点[17]。然而，浸出物得率并非直接决定药效的核心指标，其重要性相对低于活性成分含量。
建昌帮作为我国传统中药炮制的重要流派之一，其酒润蜜糠炒白芍工艺凭借独特的炮制手法与显著的临床疗效，成为地方特色炮制技术的典型代表。然而，传统炮制工艺中对“火候”的判断多依赖于老药工的个人经验，缺乏明确统一的量化标准，导致不同操作者炮制的饮片质量参差不齐。本研究通过对酒润蜜糠炒白芍炮制过程中的关键工艺参数进行系统研究，运用科学的试验设计与数据分析方法对各参数进行优化，建立了可重复、可推广的标准化工艺方案，有效弥补了传统经验中“火候”判断缺乏客观量化依据的行业空白。
目前，建昌帮酒润蜜糠炒白芍的工艺优化已取得阶段性成果，但要实现炮制技术的持续完善与质量标准的全面提升，仍有若干关键领域亟待深入探索。未来研究可重点围绕以下3个方向展开：一是深入解析酒润蜜糠炒白芍的药效物质基础，明确炮制后与临床疗效密切相关的活性成分种类及其含量变化规律，为工艺优化提供更为精准的靶向依据；二是系统探究炮制过程中的化学成分转化机制，阐明温度、时间、辅料等工艺参数对芍药苷、芍药内酯苷等核心成分的降解、转化路径及产物类型，揭示“炮制减毒增效”背后的科学内涵；三是探索指纹图谱技术在酒润蜜糠炒白芍质量评价中的应用，构建特征鲜明、专属性强的指纹图谱标准，并结合多成分含量测定，建立更为全面、可靠的质量控制体系。通过以上多维度深入研究，将进一步完善酒润蜜糠炒白芍的炮制技术体系，提升其质量标准的科学性与权威性，为中药特色炮制技术的现代化发展奠定坚实基础。
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