外泌体是由细胞分泌到细胞外的直径为30~150 nm的脂质双分子层囊泡，在细胞间通讯中发挥重要作用，其膜内含有蛋白质、脂质、核酸和代谢物等，参与生物体内多种生理、病理进程。植物来源的外泌体兼具纳米级结构和天然药理活性，已被证实具有抗炎、抗病毒、抗纤维化、调节肠道菌群及抗肿瘤等功效。其中，生姜外泌体样纳米颗粒（GELNs）因来源丰富、生物相容性高及独特药理活性成为研究热点。本文系统综述GELNs的提取技术、表征方法、成分分析及潜在应用，并探讨当前研究的局限性与未来方向，为GELNs的深入研究和临床转化提供参考。

外泌体是由细胞内的多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外的、直径约为30~150 nm的一种脂质双分子层囊泡，其膜内含有蛋白质、脂质、核酸[信使RNA（mRNA）、微小RNA（miRNA）、小干扰（siRNA）]和代谢物等[1-2]。外泌体在细胞的通讯过程中扮演着重要角色，参与各种细胞信号传导[3]。研究发现，外泌体参与免疫反应[4]、病毒感染[5]、心脑血管疾病[6]和癌症[7]等生理病理过程。近年来，外泌体的研究得到了广泛关注，最初关于外泌体的是作为临床各种疾病的早期诊断标志物[8]。后续研究发现由于外泌体特殊的脂质结构具有较好的亲和力，且易于被细胞摄取，因此其进一步被探索作为靶向药物载体[9]。随着对外泌体的进一步研究发现，其除了含有脂质、核酸和蛋白质外，还含有多种代谢产物，所以外泌体又被研究作为药物用于一些特殊疾病的治疗 [10]。特别是植物外泌体，由于其具有天然的纳米级结构以及含有独特的RNA、脂质成分、蛋白质及药理活性分子，因此受到了广泛关注。

关于植物能否分泌外泌体，最早由An等[11]于2007年提出。后经过探索，在向日葵[12]、葡萄[13]、西兰花[14]、生姜[15]、人参[16]等植物中发现外泌体样囊泡存在。并且经研究发现植物外泌体在抗炎[17]、抗病毒[18]、抗纤维化[19]、美白[20]、塑造肠道菌群[21]及抗肿瘤[22]等方面具有独特疗效。特别是关于生姜外泌体的报道最多，研究发现生姜外泌体在抗炎、抗病毒、抗癌等方面展现出稳定的药理活性。

生姜是姜科多年生草本植物姜的新鲜根茎，性温、味辛，无毒，常作为烹饪调味品，在日常生活中应用广泛[23]。同时生姜也是一种传统中药，自古以来，关于生姜的药用价值多有记载。《名医别录》记载：“味辛，微温。主治伤寒头痛、鼻塞、咳逆上气，止呕吐。又，生姜，微温，辛，归五藏。去痰，下气，止呕吐，除风邪寒热。久服小志少智，伤心气”[24]。《本草拾遗》记载：“本功外，汁解毒药，自余破血，调中，去冷，除痰，开胃”[25]。目前生姜已被发现多种药用价值，如开胃健脾、杀菌解毒、消肿止痛、抗氧化、抑制肿瘤等[26]。

生姜外泌体样纳米颗粒（Ginger-derived exosome-like nanoparticles，GELNs）兼具生姜的低毒性与独特的药理价值，并拥有良好的生物相容性和纳米级结构，从而受到广泛关注。目前，关于GELNs的研究已揭示其双重作用，包括作为新型的载药工具和广泛的药理功效。本文将从提取、表征、成分等关键技术及应用前景方面对GELNs进行综述，并结合课题组研究，指出当前研究的不足，展望未来方向，旨在为GELNs的研究开拓新思路。

1 GELNs的提取及纯化方法

外泌体通常采用的提取方法有超速离心法、超滤法、排阻色谱法、免疫亲和法、聚合物沉淀法以及微流控技术等[27]，然而植物外泌体的相关提取方法尚待完善。由于生姜质地较硬，所以一般要经过前置处理：先将生姜破碎后过滤，滤液低速离心去除沉淀和细胞碎片等，收集的上清液用于后续的提取纯化。

1.1 超速离心法

超速离心法基于囊泡密度与尺寸差异，将提取液依次通过低、高速离心及100  000~ 120  000×g的超速离心获取离心管底部沉淀的外泌体，该方法成熟度高、应用最广，所得外泌体得率与纯度均为中高水平，被视作外泌体提取的“金标准”，也是当前获取GELNs的主要手段。Anusha等[28]即采用此法，将前置处理好的生姜汁液用220 nm微孔滤膜过滤并进行离心，将上清液4℃、150 000×g超速离心90  min，沉淀用PBS重悬，再经4℃、180 000×g离心45 min，再用PBS重悬沉淀后获得GELNs。然而，尽管该方法应用范围广，可以处理较大容量的样本，但存在流程繁琐、耗时、纯度欠佳及设备依赖等问题，因此通常建议后续增加纯化步骤。

1.2 蔗糖密度梯度法

蔗糖密度梯度离心法是一种基于囊泡密度、大小和比重的分离技术，通过让样品穿过不同密度的蔗糖介质层实现精准分离。该方法常与超速离心法联用，用于对超速离心后的外泌体进行纯化，所获外泌体通常具有中等得率与较高纯度。例如，Kumar等[29]在提取GELNs时，将前置处理后的生姜汁液加入由8%、30%、45%、60% 4个浓度梯度组成的蔗糖溶液中，再进行超高速离心，最终GELNs主要富集于30%蔗糖层；收集该层条带并经PBS清洗后，即可获得高纯度GELNs。尽管该方法提取的外泌体纯度很高，但其操作流程复杂、耗时较长，对设备及操作人员技术要求较高，且每次所能富集的外泌体数量有限。

1.3 聚乙二醇共沉淀法

聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）共沉淀法属于聚合物沉淀法的一种，其原理是PEG通过竞争性结合水分子，破坏外泌体的溶解稳定性，使其从溶液中析出，进而通过低速离心实现富集。Suresh等[30]采用该方法成功提取出GELNs，并发现其产率受pH影响显著：在弱酸性条件（pH 4~5）下，GELNs的提取量较中性和碱性环境提高约4~5倍。罗浚嘉[31]的研究也验证了该方法的可行性，其将生姜前置处理后的上清液与等体积PEG 6000混合过夜，随后4℃、10 000×g离心30 min，成功富集到GELNs。尽管PEG共沉淀法具有操作简便、快速、设备要求低等优势，但所提取的外泌体纯度普遍不高，且PEG处理过程可能影响外泌体的结构完整性，导致其生物活性降低。

1.4 试剂盒提取法

试剂盒法提取外泌体具有操作简便、耗时少等优点，但其成本较高，且不同品牌试剂盒在外泌体产率上存在较大差异，因此目前采用商业试剂盒提取GELNs的研究相对有限。Yin等[32]使用Umibio公司提供的试剂盒成功分离出GELNs，其粒径为（156±36）nm，表面电荷为（-26.6±5）mV。

1.5 超滤法

超滤法是一种基于尺寸分离原理的传统外泌体提取方法，通过采用特定孔径的超滤膜，在压力或离心驱动下使外泌体被截留于膜表面，而小分子物质（如蛋白质、水等）则透过滤膜，从而实现分离。该方法已被成功应用于植物源外泌体的提取，例如在胡萝卜外泌体样纳米颗粒的分离中即得到验证[33]。超滤法操作相对简便、成本较低、效率较高，且适用于大体积样本的处理；然而，该方法常因膜堵塞与污染问题导致外泌体得率下降，限制了其应用。

1.6 尺寸排阻色谱法

尺寸排阻色谱法是一种基于多孔凝胶柱分子筛效应的分离技术，其依据样品中分子的流体动力学半径实现分级分离。在该方法中，外泌体因体积较大无法进入凝胶孔隙，率先被洗脱；而小分子蛋白等物质则因进入孔隙内部，迁移路径延长，洗脱时间较晚。Steć等[34]采用自主开发的尺寸排阻液相色谱法，成功实现了柠檬中外泌体的提取分离。该方法能够较好地保持外泌体的结构完整性与生物活性，且所得产物纯度和得率较高；然而，其样本处理体积有限，洗脱过程中外泌体易被稀释，后续应用需经反复浓缩，同时该方法对专业设备与试剂的要求也较高。

目前，GELNs的提取方法主要包括超速离心法、PEG共沉淀法、试剂盒法与蔗糖密度梯度法。此外，超滤法与尺寸排阻色谱法在理论上同样适用于GELNs的富集。其中，超滤法因样本处理量大、操作相对简便，在生姜来源广泛、样本体积充足的背景下，展现出良好的工业化批量提取潜力；而尺寸排阻色谱法虽因处理样本量有限而不适于大规模制备，但其能够保持外泌体的高纯度与完整生物活性，因此在GELNs的前期药理活性研究中具有重要价值。总体而言，在实验研究阶段，超速离心法、蔗糖密度梯度法与尺寸排阻色谱法应用较为广泛；而在工业化研究中，超滤法具有更大的应用潜力。

2 GELNs的表征及鉴定

当前外泌体表征技术已趋多样化，其中形态、粒径与电位分析为最常用的三大手段，其他还包括标志蛋白检测、蛋白浓度与数量分析等。形态观察作为最直观的方法，被视为外泌体鉴定的“金标准”，常用设备包括扫描电子显微镜、透射电子显微镜和原子力显微镜。透射电镜结果显示，GELNs与动物外泌体形态相似，均呈现典型的杯状、盘状或椭圆形双层脂质结构，切面可见明暗双层，外层较亮而内层较暗。粒径分析则主要依赖动态光散射与纳米颗粒跟踪分析技术。

在Zeta电位方面，不同提取方法所得GELNs的电位存在一定差异。Yin等[32]通过试剂盒提取的GELNs电位为（-26.6±5）mV；Zhuang等 [35]经蔗糖密度梯度离心纯化的GELNs电位介于-29.7~-24.6 mV；而Anusha等[28]采用超速离心法所得样品的平均电位为-12.7 mV。尽管所测电位结果不同，但普遍认为GELNs带负电荷，其Zeta电位通常落在-30~0 mV范围内。

此外，Western blotting可用于检测外泌体标志蛋白，流式细胞术则可分析外泌体数量。然而，目前针对植物外泌体的研究尚不充分，GELNs的特异性标志蛋白尚未明确，其鉴定仍主要依赖形态与粒径测定。另外流式分析对设备要求高、操作复杂，且其功能在一定程度上可被纳米颗粒跟踪分析覆盖，因此该方法在植物外泌体研究中的应用相对有限。

3 GELNs的成分分析

GELNs中含有丰富的蛋白质、脂质、核酸及代谢物等多种生物活性成分（表1），这些成分是其发挥药理功能的主要物质基础（图1）。目前，针对GELNs成分的分析主要采用微阵列技术和基于质谱的组学方法，然而相关研究仍处于初步阶段，其成分组成与功能机制尚待进一步系统解析。

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  表格1 GELNs的成分

  Table 1.The composition of GELNs

  注：磷脂酸（phosphatidic acid，PA）；磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine，PC）；磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE）；磷脂酰甘油（phosphatidylglycerol，PG）；磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）；磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，PS）；甘油二酯（diacylglycerol，DAG）；双半乳糖甘油二酯（digalactosyldiacylglycerol，DGDG）；单半乳糖甘油二酯（monogalactosyldiacylglycerol，MGDG）；甘油三脂（triglyceride，TG）；溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LPC）；溶血磷脂酰甘油（lysophosphatidylglycerol，LPG）；溶血磷脂酰乙醇胺（lysophosphatidylethanolamine，LPE）；12-氧代植物二烯酸（12-oxophytodienoic acid，OPDA）；二去甲-12-氧代植物二烯酸（dinor-12-oxophytodienoic acid，dnOPDA）。

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  图1 GELNs成分与药理作用互作关系网络图

  Figure 1.Network diagram of the interaction between GELNs components and pharmacological effects

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3.1 核酸

外泌体作为细胞间的通讯载体，含有 mRNA、miRNA等大量遗传物质，不仅在植物生长发育、免疫应答及环境胁迫响应中扮演重要角色，部分特殊遗传物质还可以在疾病治疗中发挥关键作用。殷李芬[36]通过转录组测序，在GELNs中发现了134种miRNAs，多数与生姜共表达的miRNA一同参与了植物生长分化与多种胁迫响应的调控。通过人类的靶基因预测和基因本体论分析发现，这些miRNAs同样可参与调控人体内多个信号通路，如炎症及癌症等相关的信号通路。Teng等[18]在GELNs中发现了532种miRNAs，并证实了GELNs中的miRNA可用于治疗SARS-CoV-2 Nsp12介导的肺部炎症。GELNs内所含的miRNA被视为其能够作为某些特殊疾病靶向药物的重要根源。

3.2 脂质

脂质是外泌体膜的核心成分，外泌体中含有多种脂质分子，其中部分脂质用于维持囊泡结构的稳定性，部分参与细胞信号转导，还有一些在调控疾病进程中发挥重要作用。因此，明确GELNs中的脂质组成，将极大推动其药理机制的研究，并有望在该领域实现重要突破。

Zhuang等[35]在GELNs中发现PA、PS、PI、PE、PC、PG、LPG、LPC、LPE、DGDG、单半乳糖单酰甘油（monogalactosyl monoacylglycerol，MGMG）等脂质分子，其中PA、DGDG、MGMG为主要成分，占比分别为40.41%、32.88%、19.65%。Yan等[37]在GELNs中也发现了PE、PC、PA、PI、PG、DGDG、MGDG、PS等多种脂质分子，其中PA、MGDG、PE、DGDG占比在10%以上。Sundaram等[38]研究发现GELNs中还含有DAG、TG等脂质分子。

3.3 蛋白质

外泌体富含多种蛋白质，囊泡膜上镶嵌的蛋白主要参与调节外泌体与受体细胞的融合以及外泌体的转运，内部还有多种代谢酶、核糖体蛋白、信号转导因子、黏附因子等。目前GELNs的给药浓度常依据蛋白浓度确定，但其具体的蛋白成分构成尚不明确。

3.4 代谢物

GELNs中的代谢物主要指具有独特药理活性的小分子化合物，这类化合物在疾病治疗中发挥着重要作用。研究表明GELNs中含有丰富的酚类化合物，包括姜辣素和姜烯酚等。Zhuang等[35]通过薄层色谱发现生姜提取物中的姜烯酚来源与GELNs有关。Zhang等[39]通过高效液相色谱质谱联用计术在GELNs中发现了生姜抗炎的活性成分6-姜酚和6-姜烯酚。GELNs中的活性代谢产物是其药理活性来源之一，然而目前关于GELNs更详细的活性代谢产物研究并不多。

4 GELNs的应用

4.1 抗炎

生姜作为一种药食同源的传统中药材，含有多种姜酚和姜烯酚等抗炎活性成分，GELNs的抗炎功效也是目前其研究最广的药理活性。牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）是导致慢性牙周炎的一种主要病原菌。Sundaram等[38]发现GELNs可以通过其携带的PA和miRNA增加P. gingivalis细胞膜的通透性和下调其毒力蛋白因子表达，进而减少其对牙龈上皮细胞的黏附及侵袭，抑制其增殖并削弱致病性，从而缓解局部炎症。Yin等 [32]通过细胞实验证实了GELNs可显著抑制核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）、白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）等基因的表达来抵消脂多糖诱导的炎症。Zhang等[39]研究发现GELNs经口服后可被肠上皮细胞和巨噬细胞吸收，通过减轻黏膜炎症和免疫细胞浸润，促进肠道修复，从而缓解急性结肠炎和预防慢性结肠炎的发生。

4.2 抗病毒

冠状病毒是成人普通感冒的主要病原体之一，其中新型冠状病毒感染严重时可引发细胞因子风暴；细胞因子过度产生会导致肺上皮细胞、血管内皮细胞损伤及免疫细胞持续浸润，最终导致患者死亡率升高。Teng等[18]将接种严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的小鼠给予GELNs治疗，发现GELNs中的大量的miRNA可以与SARS-CoV-2病毒基因组中多个位点结合，抑制病毒基因的表达和病毒复制。其中aly-miR-396a-5p可特异性结合SARS-CoV-2的非结构蛋白12（nonstructural protein 12，Nsp12）基因，rlcv-miR-rL1-28-3p能靶向病毒刺突糖蛋白（S蛋白）基因，分别抑制Nsp12和S蛋白的表达，进而阻断病毒复制及病毒诱导的细胞病变效应。同时，GELNs中的aly-miR-396a-5p可抑制exosomesnsp12/13激活的NF-κB通路，减少炎症因子释放，缓解肺部炎症，并降低肺上皮细胞凋亡率。

4.3 预防肥胖和糖尿病

高脂饮食（high-fatdiet，HFD）会改变细胞生理并导致肥胖或2型糖尿病等发生。研究表明细胞内miR-375受到抑制会导致高血糖症，反映为胰岛素抵抗症[40-41]。Kumar等[29]将HFD小鼠口服给予GELNs治疗，发现miR-375表达受到抑制的情况发生了逆转。同时，GELNs可以介导miR-375分选进入肠上皮细胞外泌体中，靶向大肠杆菌色氨酸酶，抑制其基因表达，并调节胰岛素信号相关基因的表达，从而改善HFD小鼠粪便外泌体诱导的葡萄糖不耐受和胰岛素抵抗，促进葡萄糖的摄取。GELNs还可以通过保护叉头框转录因子A2（forkhead box a2，Foxa2）免受蛋白激酶B1（protein kinase B1，Akt-1）介导的磷酸化，维持肠道—肝脏Foxa2信号稳态来预防HFD引起的肥胖和胰岛素抵抗[42]。GELNs经口服被HFD小鼠肠道上皮细胞摄取后，其富含的活性成分（如 PA）会激活Foxa2转录，使小鼠肠道、肝脏中Foxa2表达量恢复至接近正常小鼠饮食水平，重建胰岛素信号通路的 “上游调控基础”。且PA可特异性结合Foxa2的Thr156位点，形成空间屏障，阻止Akt-1与该位点结合，从而抑制其磷酸化。

4.4 预防肝脏相关疾病

肝脏作为人体最大的消化腺，承担着物质代谢、解毒、凝血因子合成及免疫防御等重要功能，是人体最重要的器官之一，然而因为全球环境的改变、生活节奏加快以及不合理的生活方式导致肝脏每天都在遭受各种各样的损伤。Zhuang等[35]将小鼠喂养酒精和GELNs，发现GELNs可以保护小鼠免受酒精引起的肝损伤。GELNs通过其富含的姜烯酚调控Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）/含有TIR结构域的接头诱导干扰素-β（TIR-domain containing adaptor inducing interferon-β，TRIF）通路，诱导肝细胞中的核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）核转位，进而上调血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）、NAD(P)H：醌氧化还原酶1（NAD(P)H：quinone oxidoreductase 1，NQO1）等肝脏解毒、抗氧化基因表达，减少活性氧（reactive oxygen species，ROS）生成，从而调节肝细胞稳态、抗氧化防御和肝脏细胞周期进程，显著缓解酒精诱导的肝损伤。这一作用机制为预防酒精性肝损伤等肝脏疾病提供了新的干预策略。

4.5 调节肠道菌群

肠道菌群在维持宿主生理机能方面发挥着重要作用，肠道菌群的改变会引发多种生理紊乱 [43]，导致营养吸收和身体免疫功能下降。Teng等[21]通过小鼠实验和健康志愿者证实了GELNs可使肠道乳杆菌科、拟杆菌科丰度升高，梭菌科降低。GELNs被吸收后其miRNA可调控肠道菌群的组成、代谢及基因表达，其mdo-miR-7267-3p可以激活肠道淋巴细胞中的芳烃受体（aryl hydrocarbon receptor，AHR）通路，降低肠道通透性，减少促炎因子IL-1β、TNF-α的释放，保护肠道屏障；gma-miR-396e靶向抑制LexA阻遏蛋白（LexA repressor，LexA），解除对七号缺失蛋白同源物（Son of sevenless，SOS）通路的抑制，促进鼠李糖乳杆菌（lactobacillus rhamnosus，LGG）增殖；ath-miR-167a靶向下调菌毛表面蛋白C（surface protein C，SpaC），减少LGG在肠道黏膜的定植，降低其入血及肝转移风险。最终介导肠道菌群与宿主免疫系统之间的串扰，维持免疫系统与肠道菌群间的稳态平衡，达到调节肠道菌群组成、代谢、生长和定位的作用。

4.6 抗癌

乳腺癌是目前发病率最高的癌症[44]，也是目前影响女性健康的最危险因素，其中三阴性乳腺癌因向重要器官转移率高、复发窗口期长，是其中最具挑战型的亚型[45]。Anusha等[28]通过细胞实验发现，GELNs可抑制MDA-MB-231细胞的迁移和克隆形成，促进细胞内ROS的积累，同时降低线粒体膜电位，激活内源性凋亡途径和外源性凋亡途径，进而诱导细胞发生G2/M期停滞和凋亡。表现为细胞的形态发生显著变化（如细胞核碎裂、细胞膜损伤）、ROS生成增加、线粒体膜电位显著下降，细胞周期蛋白B（cyclin B）和细胞分裂周期蛋白2（cell division cycle 2，Cdc2）表达呈浓度依赖性下降，B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）相关死亡促进因子（Bcl-2-associated death promoter，Bad）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein，Bax）、Bcl-2相互作用介导死亡蛋白（Bcl-2-interacting mediator of cell death，Bim）等促凋亡蛋白表达增加，Bcl-2等抗凋亡蛋白表达减少。

4.7 靶向递送药物

传统药物在疾病治疗中常因靶向性不足而引发较多副作用，尤其在癌症治疗领域，化疗药物导致的脱发、呕吐及白细胞减少等问题尤为突出。因此，开发特异性强的靶向药物已成为现代精准医疗的核心任务，而其中药物递送系统的构建更是关键挑战。外泌体凭借其天然的纳米尺度及细胞间通讯能力，被视为极具潜力的靶向载体。然而，动物细胞来源的外泌体存在产量低、制备周期长、工艺复杂等问题，难以满足临床应用的效益需求。相比之下，植物外泌体因其来源广泛、产量高、生物相容性良好等突出优势，正受到日益广泛的关注。

Li等[46]考虑到GELNs未携带被人体细胞识别的配体，所以通过RNA纳米技术修饰GELNs结构，将配体装载到GELNs表面，以增强靶向特异性；然后将装载siRNA的GELNs作为靶向药物用于研究其对肿瘤的抑制效果，在体外实验中无配体治疗组与靶向治疗组均显示出显著的肿瘤抑制效果；而在体内复杂的生理环境中，靶向治疗组仍然表现出优异的肿瘤抑制效果，这表明GELNs极易被细胞摄取，并且具有强大的药物递送潜力，但是需要进一步解决在体内的生物相容性。

GELNs已通过体内外实验证实，在抗炎、抗病毒、肝脏保护、肠道菌群调节及抗糖尿病等方面展现出良好的药理活性和生物安全性，且无显著毒性。细胞实验进一步表明，GELNs能够抑制癌细胞迁移、阻滞细胞周期并诱导其凋亡（表2）。与来源受限的人源或细胞来源外泌体相比，GELNs具有原料易得、制备成本低的显著优势，显示出更广阔的临床转化前景。此外，其天然的纳米级结构也为新型药物递送系统的设计提供了重要的研究参考与应用价值。

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  表格2 GELNs的药理作用及机制

  Table 2.The pharmacological action and mechanism of GELNs

  注：“—”表示未报道。

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5 结语

GELNs 作为药食同源的天然纳米制剂，凭借其良好的生物相容性和独特的药理活性，在疾病治疗与药物递送中展现出巨大潜力，相关研究已取得阶段性进展。在GELNs的提取中，超速离心法、蔗糖密度梯度法及PEG共沉淀法均已成功实现其富集，超滤法与尺寸排阻色谱法在理论上亦具备可行性。然而，PEG共沉淀法可能影响GELNs的生物活性；相比之下，超速离心法、蔗糖密度梯度法与尺寸排阻色谱法因能较好地维持其生物活性并保证较高纯度，更适用于实验研究阶段。而在工业化应用中，超滤法因其处理样本量大的特点展现出显著优势。值得注意的是，将多种方法结合使用（如先提取后纯化）可进一步提高GELNs的提取效率与产物纯度。

当前对GELNs的表征仍主要依赖于形态、粒径和电位等基础指标，随着研究的不断深入，其特异性分子标志物的发掘将成为未来的重点方向。在功能研究方面，GELNs已展现出抗炎、抗病毒、肝脏保护、肠道菌群调节、糖尿病防治及抗肿瘤等多种药理活性。动物实验及健康受试者试验均证实其具有优良的生物安全性与生物相容性，显示出广阔的临床转化前景，尤其在调节肠道菌群、抗炎、糖尿病干预及肝脏疾病预防等领域具备较高的临床转化价值。

作为一类天然纳米制剂，GELNs在药物递送系统的构建中展现出显著优势。目前，尽管其在药效研究方面已取得显著进展，但整体研究仍处于初步阶段，亟需进一步推动其向临床应用的转化。未来研究可朝多元化方向发展：一方面，可基于其药食同源特性与天然纳米结构，将其与水凝胶等材料结合，开发外用医疗制剂或功能性护肤品（如面膜）[47]；另一方面，可借助合成生物学与纳米工程技术对GELNs进行功能化改造，以拓展其生物医学应用场景。这些跨学科融合策略不仅为GELNs的深入研究提供了新思路，也将有力加速其临床转化进程。

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