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微性状鉴定法在医疗机构中药饮片质量验收中的应用

更新时间:2024年09月04日阅读:98次 下载:57次 下载 手机版

作者: 章璐璐 1, 2 楼招欢 3 朱雪梅 1 陈永财 2 朱晶晶 2 黄乐艳 2

作者单位: 1. 浙江中医药大学附属温州市中医院临床药学部(浙江温州 325000) 2. 浙江中医药大学附属温州市中医院中药房(浙江温州 325000) 3. 浙江中医药大学药学院(杭州 310053)

关键词: 微性状鉴定法 中药饮片 质量验收 应用价值 药事管理 医疗机构 谷精草 枳壳 木瓜 紫苏子 沙苑子 卷柏 金钱草 贯众 猫人参

DOI: 10.12173/j.issn.1008-049X.202404179

基金项目: 浙江省中医药科技计划项目(2015ZA105);浙江省温州市科技计划项目(Y20220921)

引用格式: 章璐璐,楼招欢,朱雪梅,陈永财,朱晶晶,黄乐艳.微性状鉴定法在医疗机构中药饮片质量验收中的应用[J]. 中国药师,2024, 27(8):1309-1319.DOI: 10.12173/j.issn.1008-049X.202404179.

ZHANG Lulu, LOU Zhaohuan, ZHU Xuemei, CHEN Yongcai, ZHU Jingjing,HUANG Leyan.Application of micro-macroscopical identification in quality acceptance of Chinese herbal pieces in medical institutions[J].Zhongguo Yaoshi Zazhi,2024, 27(8):1309-1319.DOI: 10.12173/j.issn.1008-049X.202404179.[Article in Chinese]

摘要| Abstract

目的  针对易混淆中药饮片采用微性状鉴定法进行鉴别,研究其在医疗机构饮片验收中的应用价值。

方法  采用微性状鉴定法,借助相关仪器,以花、果实、种子、全草、根与根茎、茎、其他等不同入药部位为分类对10组31种易混淆中药表面肉眼和普通放大镜无法观察到的微观特征进行分析、归纳和总结,并拍照留存。

结果  观察到10组31种易混淆中药谷精草、华南谷精草、毛谷精草、枳壳、常山胡柚、木瓜、毛叶木瓜、紫苏子、白苏子、野生紫苏、沙苑子、华黄芪、卷柏(卷柏)、卷柏(垫状卷柏)、江南卷柏、深绿卷柏、翠云草、金钱草、点腺过路黄、广金钱草、绵马贯众、狗脊蕨贯众、苏铁蕨贯众、猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根、五灵脂、夜明砂、望月砂和蚕砂的微性状特征,发现各类中药具有独特的鉴别特征,花类中药可研究色泽、组织构造及表面特征(如纹理、毛被等);果实类可研究果皮结构、色泽、发达程度及外层特征(如角质层、蜡被等);种子类可研究形态、大小、色泽与纹理;全草类可研究叶的长宽比、最宽处、表面特性与分裂情况,以及茎的茸毛、气孔等;根与根茎、茎类中药可研究皮部、木部构造及维管束或导管的形态与排列,其他类别可从源头入手,借助微观镜头发现其特有微性状鉴别特征。

结论  微性状鉴定法作为传统性状鉴别的补充,能提高中药饮片鉴定的准确性,该方法经济实用、简便易行且结果直观,可作为一项常用的中药鉴定方法在医疗机构中推广普及,是实现中药快速检验的可行方案。

全文| Full-text

足轻重的地位。当前,医疗机构的饮片质量验收以传统的性状鉴别为主,即眼观、手摸、鼻闻、口尝等,主观性较强,且要求质检人员需要具备丰富的验收经验和知识储备。微性状鉴定法[2]作为近年来兴起的新型中药鉴定方法,结合了传统的性状鉴定与显微鉴定,采用简单的仪器对饮片表面肉眼不易见的细微性状进行观察、拍照,具有鉴别速度快、结果直观等优势,可作为传统性状鉴别的补充。因此,汇总近几年来易混淆的10组31种易混淆的中药饮片,采用微性状鉴定法,探讨其在医疗机构饮片验收中的价值。

1 材料与方法

1.1 主要仪器

BL-2010DN型显微镜(鄂州市贝朗科技有限公司);OMT-10A型连续变倍单筒显微镜(苏州欧米特光电科技有限公司);电子摄像目镜、IMAGEVIEW软件和PHTOTSHOP软件。

1.2 材料

10组31种易混淆中药饮片来源于浙江中医药大学中药饮片有限公司、杭州华东中药饮片有限公司、亳州中药材市场和玉林中药材市场,均由温州市中医院临床药学部学术主任、主任中药师朱雪梅鉴定符合相关标准,具体见表1。

  • 表格1 样品信息
    Table 1.Information of samples
    注:a. 浙江中医药大学中药饮片有限公司;b. 杭州华东中药饮片有限公司;c. 亳州中药材市场;d. 玉林中药材市场。

1.3 方法

1.3.1 制备装片

清洗整理样品表面,置于载玻片上,根据样品颜色选择不同颜色的背景。制片时需将样品放置于不同的角度,以便观察到不同的微性状特征。

1.3.2 样品拍摄

安装电子摄像目镜,调整光源,打开IMAGEVIEW软件,调节显微镜以获得清晰图像。拍摄时,旋转显微镜准焦螺旋,使视野从模糊调到清晰,再从清晰调到模糊,以获取更多图像数据,用于最终的图像景深合成。

1.3.3 图片处理

使用PHOTOSHOP软件,将捕获的同一组图像加载其合成软件中,依次进行“自动混合层”和“合并图层”的操作,最终获得清晰的照片。

1.3.4 微性状鉴别

根据拍摄到的样品微性状特征进行描述与总结。

2 结果

2.1 微性状鉴别法在花类中药鉴别中的应用

花作为种子植物特有的繁殖器官,其形态和构造因植物种类而异。花的形态特征较为稳定,变异性较小,能反映植物长期进化中的变化。文献检索和试验表明,花类中药通常具有鲜艳的色泽、鲜明的组织构造和独特的表面特征。花被、花萼、花托、花蕊、子房、胚珠等部位的构造、纹理、毛被、附属物、分泌物的特征均具有特异性,可用于花类中药的微性状鉴别。

谷精草为谷精草科植物谷精草的干燥带花茎的头状花序入药,其混淆品包括同科华南谷精草和毛谷精草。谷精草组中药最显著的鉴别特征即为花序的形状、质地、密生的白色柔毛,花茎的大小及表面是否被毛或具凹槽,具体见图1,主要鉴别特征见表2。

  • 图1 谷精组微性状鉴别特征
    Figure 1.Micromorphology of Eriocauli flos group
    注:A~D. 谷精草;E~H. 华南谷精草;I~L. 毛谷精草。

  • 表格2 谷精草组微性状鉴别表
    Table 2.Micromorphology table of Eriocauli flos group

2.2 微性状鉴别法在果实和种子类中药鉴别中的应用

果实为被子植物独有的繁殖器官,其外层常被有角质层、蜡被、毛茸、刺、瘤突、翅等附属物,果皮的构造、色泽、各果皮层的发达程度因植物种类而异。种子类中药普遍较小,部分肉眼难以观察,其形态、大小、色泽、表面纹理等,亦随植物种类不同而异。

2.2.1 枳壳组

枳壳来源于芸香科柑橘属植物酸橙及其栽培变种品的未成熟果实,饮片验收中常遇到的混淆品为同科植物常山胡柚的未成熟果实,常山胡柚习称“衢枳壳”,为浙江地方品种[3]。两者主要鉴别特征为外果皮的表面皱缩程度,外缘油室的形态、分布,分泌物的颜色、形态等,具体见图2,主要鉴别特征见表3。

  • 图2 枳壳组微性状鉴别特征
    Figure 2.Micromorphology of Aurantii fructus group
    注:A~C. 枳壳;D~F. 常山胡柚。

  • 表格3 枳壳组微性状鉴别表
    Table 3.Micromorphology table of Aurantii fructus group

2.2.2 木瓜组

木瓜来源于蔷薇科植物贴梗海棠近成熟果实,饮片验收时主要的混淆品为同科植物毛叶木瓜近成熟果实。较木瓜,毛叶木瓜表面色更深,有漆样光泽,残留花柱基有毛,切面果肉较薄等,具体见图3,主要鉴别特征见表4。

  • 图3 木瓜组微性状鉴别特征
    Figure 3.Micromorphology of Chaenomelis fructus group
    注:A~C. 木瓜;D~F. 毛叶木瓜。

  • 表格4 木瓜组微性状鉴别表
    Table 4.Micromorphology table of Chaenomelis fructus group

2.2.3 紫苏子组

紫苏子来源于唇形科植物紫苏的成熟果实,原植物在形态上却存在叶色两面均绿(习称“白苏”)及背青面紫或两面均紫(习称“紫苏”)的差别,其果实亦有“白”“紫”之分。关于“白苏”与“紫苏”在植物学分类上是否应区分处理,学界长期存在争议。大部分学者认为,“白苏”是由“紫苏”在漫长的栽培过程中,由于土壤、水源等环境的不同而衍生,“白”“紫”为种内形态差异。然而,历代本草文献及实际应用中“白苏”和“紫苏”多分别对待,如《名医别录》中将紫苏分为“苏”(现代“紫苏”)与“荏”(现代“白苏”)记载[4]。尽管两者药效相近,但“白苏”效力稍逊。此外,饮片验收时偶见野生紫苏,其来源与《中国药典(2020版)》并有所出入。紫苏子、白苏子、野生紫苏同科同属,形态较为相似,主要区别在大小、色泽和网纹上,具体见图4,主要鉴别特征见表5。

  • 图4 紫苏子组微性状鉴别特征
    Figure 4.Micromorphology of Perillae fructus group
    注:A~C. 紫苏子;D~F. 白苏子;G~I. 野生紫苏。

  • 表格5 紫苏子组微性状鉴别表
    Table 5.Micromorphology table of Perillae fructus group

2.2.4 沙苑子组

  沙苑子来源于豆科植物扁茎黄芪(蔓黄芪)成熟种子,易混淆品为同科华黄芪的成熟种子。沙苑子略呈肾形而稍扁,表面光滑且密布黑点,一侧边缘具微凹圆形种脐,质坚硬不易破碎;华黄芪种子则呈肾形,颗粒更为饱满,且表面黑点更为密集,具体见图5。

  • 图5 沙苑子组微性状鉴别特征
    Figure 5.Micromorphology of Astragali complanati semen seed group
    注:A~C. 沙苑子;D~F. 华黄芪。

2.3 微性状鉴别法在全草类中药鉴别中的应用

全草类中药的微性状鉴别是当前研究的热点之一。从文献检索和实验可知,茎、叶、果实种子、花等在微观镜头下都有明显且较多的鉴别要点。其中,叶与茎作为常见且易获取的鉴别部位,贯穿植物生长的每个阶段。尽管叶的形状、大小随植物种类而异,但同一种植物叶的性状相对稳定,其长宽比例、最宽处位置、表面特征(光滑、粗糙、毛被等)、分裂情况(全缘、具齿、缺刻等)皆可作为微性状鉴别的要点。全草类中药的茎多为草质茎,微观下可察茸毛、气孔、角质层、蜡被等细微结构。

相比之下,花、果实、种子因时节性强且易在采收至加工各环节中脱落,获取难度较大。而大多数全草类中药为草本植物的地上部分,少数才带有的根或根茎,亦较难得。

2.3.1 卷柏属组

卷柏来源于卷柏科植物卷柏与垫状卷柏全草;江南卷柏、深绿卷柏、翠云草来源于同科同属植物江南卷柏、深绿卷柏、翠云草的全草。卷柏(卷柏)、卷柏(垫叶卷柏)、江南卷柏、深绿卷柏、翠云草皆有中叶(腹叶)、背叶(侧叶)之分,卷柏(卷柏)、卷柏(垫叶卷柏)、翠云草中叶与背叶形态相似,江南卷柏、深绿卷柏两叶形态各异,翠云草枝端有时可见孢子叶穗呈四棱柱形,具体见图6,主要鉴别特征见表6。

  • 图6 卷柏属组微性状鉴别特征
    Figure 6.Micromorphology of Selaginellae herba group
    注:A~C. 卷柏(卷柏);D~F. 卷柏(垫叶卷柏);G~I. 江南卷柏;J~L. 深绿卷柏;M~O. 翠云草。

  • 表格6 卷柏属微性状鉴别表
    Table 6.Micromorphology table of Selaginellae herba group

2.3.2 金钱草组

金钱草来源于报春花科植物过路黄全草,混淆品有来源于同科同属植物点腺过路黄的全草,功效相近的有来源于豆科植物广(东)金钱草的地上部分的广金钱草。金钱草和点腺过路黄的区别在于茎表面毛被,以及水浸后对光透视叶片所呈现的条纹或腺点,广金钱草与上两者区别较大,具体见图7,主要鉴别特征见表7。

  • 图7 金钱草组微性状鉴别特征
    Figure 7.Micromorphology of Herba Lysimachiae herba group
    注:A和B. 金钱草;C和D. 点腺过路黄;E和F. 广金钱草。

  • 表格7 金钱草组微性状鉴别表
    Table 7.Micromorphology table of Lysimachiae herba group

2.4 微性状鉴别法在根与根茎、茎类中药鉴别中的应用

根与根茎、茎类中药的微性状鉴别要点各有不同,不能一概而论。根、茎类中药存在多种变态特征,主要的观察点在皮部、木部,部分中药有明显的维管束或导管,其排列方式亦为鉴别的特征点。

2.4.1 贯众组

绵马贯众来源于鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨的根茎和叶柄残基,易与乌毛蕨科植物狗脊蕨和苏铁蕨等贯众混淆。3种贯众主要的鉴别点在根茎和叶柄残基切面形态,维管束的形态和排列,黑色筋脉的特定形态等,具体见图8,主要鉴别特征见表8。

  • 图8 贯众组微性状鉴别特征
    Figure 8.Micromorphology of Cyrtomium fortunei group
    注:A~C. 绵马贯众;D~F. 狗脊蕨贯众;G~I. 苏铁蕨贯众。

  • 表格8 贯众组微性状鉴别表
    Table 8.Micromorphology table of Cyrtomium fortunei group

2.4.2 猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根组

猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根皆为地方习用品种,就浙江地区而言,猫人参来源于猕猴桃科植物对萼猕猴桃或大籽猕猴桃根及粗茎;藤梨根为同科同属植物中华猕猴桃根及地下茎;雷公藤为卫矛科植物雷公藤去皮的根;野葡萄根为葡萄科植物蛇葡萄或异叶蛇葡萄的根。此4种饮片性状较为相似,在饮片验收中极易混淆。其主要鉴别要点为皮部木部比例,导管、结晶体的形态和分布,髓的有无及形态等见图9,具体区别见表9。

  • 图9 猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根组微性状鉴别特征
    Figure 9.Micromorphology table of root of Valvate actinidia, Actinidia arguta, Tripterygium wilfordii, and root of Romanet grape group
    注:A~C. 猫人参;D~G. 藤梨根;H~K. 雷公藤;L~O. 野葡萄根。

  • 表格9 猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根组微性状鉴别表
    Table 9.Micromorphology table of root of Valvate actinidia, Actinidia arguta, Tripterygium wilfordii, and root of Romanet grape group

2.5 微性状鉴别法在其他中药鉴别中的应用

其他种类中药的鉴别要点各不相同,从其来源着手,不难在微观镜头下找到其特有的鉴别特征。以动物粪便类中药为例,五灵脂来源于鼯鼠科复齿鼯鼠;夜明砂来源于东方蝙蝠等多种蝙蝠;望月砂来源于华南兔及同属野生兔;蚕砂来源于家蚕,其鉴别多与动物体型和食物类型有关。以大小论,蚕砂最小,五灵脂次之,望月砂较大,夜明砂未成形。五灵脂因复齿鼯鼠食油脂类食物而具光泽;夜明砂因东方蝙蝠等蝙蝠食多种昆虫可见昆虫的头、足、翅等破碎残骸;望月砂因华南兔等野兔食草而见植物纤维混杂其中;蚕砂内亦可见纤维,然纤维较望月砂更为纤细。具体见图10。

  • 图10 粪便组微性状鉴别特征
    Figure 10.Micromorphology of dung group
    注:A和B. 五灵脂;C和D. 夜明砂;E和F. 望月砂;G和H. 蚕砂。

3 讨论

近年来,随着中药产业化与市场化的加剧,中药品种混乱、以次充好、掺杂增重、非法加工、滥用农药化肥等问题频发,严重威胁用药安全。因此,饮片质量验收作为医疗机构保障药品质量的首要环节显得尤为重要。验收须严格遵循国家及地方药品标准,不合格品需拒收或销毁,有疑义的需委托国家认定的药检部门进行鉴定。有条件的医院可设置中药饮片检验室、标本室,并能掌握《中国药典》收载的中药饮片常规检验方法,以保障患者的用药安全。尽管现代分析技术如光谱法、色谱法及DNA条形码鉴定等发展迅速[5],但因其高成本和高技术门槛,尚未普及于普通医疗机构的饮片验收中。当前,医疗机构仍主要依赖传统的性状鉴别方法,该方法源于历代医家经验,简便快捷,符合中医药理论,但亦需突破主观性强、对人员经验要求高等局限。

中药微性状鉴定法,作为近年来兴起的中药鉴定方法,利用简单仪器和图像处理软件观察中药表面微不可见的性状,结合性状鉴定与显微鉴定,将中药性状的宏观观察延伸到微观领域[6-7]。与传统性状鉴别相比,微性状鉴定法有更客观的图片、信息等作为支撑,与显微鉴定相比,微性状鉴定法结果较为整体,能很好地与中药的宏观特征相联系。该方法不仅能对中药品种进行生药学研究 [8- 9],确定基源[10]、辨别真伪[11],对不同产地的中药进行品质研究[12-13],也能轻而易举地发现中药掺杂 [14]、增重[15]、非法染色[16]等质量问题。不仅适用于植物类中药[17-18],也适用于动物[19]与矿物类中药[20],自提出以来,以准确、便捷、直观、廉价、适合基层等的优势,正逐步被业内接受[21],可作为传统性状鉴定方法的重要补充,在医疗机构中推广普及,是中药快速检测的一种可行方案。

祖国中药资源之丰富、品种之繁多,堪称世界之冠,鉴于时间和精力的限制,本次研究聚焦于花、果实、种子、全草、根与根茎、茎、其他等入药部位,对医疗机构饮片质量验收中常见的易混淆品种,开展了微性状鉴别探索,暂未涵盖皮、茎木、动物、菌藻、矿物等类中药,旨在抛砖引玉,引发同仁对微性状鉴定法的兴趣和探索。通过文献回顾和试验分析,可以看出微性状鉴定法在果实种子[6, 22]、全草[23]、花[24]、动物[13]、矿物[20]类中药中运用更有优势。究其原因,可能由于其起源于植物界新兴的微形态学,即对植物的各器官表面细微的形态特征进行微观观察,果实、种子、全草、花类有着较为明显的表面细微特征,如纹理、毛被、腺体等。动物、矿物类有着专属性特征,更容易被捕捉;果实、种子类中药材相对较小;全草类特征不直观;动物类价值高易伪造,均促使微性状鉴定法成为必要的补充手段。相比之下,根与根茎、茎木、皮类等宏观特征已较为显著,微观下特征反而不甚典型。未来,笔者计划进一步扩大范围、完善研究,通过深入的微性状研究,总结一般规律,挖掘微性状鉴定法在医疗机构中药饮片质量验收中的价值,使其成为中药性状鉴定的重要补充。

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