目的  优选茅梅分散片的制备工艺，并测定其溶出度。

方法  在单因素试验的基础上，以微晶纤维素（MCC）、交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、低取代羟丙基纤维素（L-HPC）为影响因素，崩解时间为评价指标，采用中心复合设计-效应面法优化茅莓分散片的处方工艺。再以茅莓总皂苷为指标，参考中国药典方法测定溶出度。

结 果 最优处方工艺为茅莓总皂苷浸膏粉用量为36.9%，MCC用量为42%，PVPP用量为13%，L-HPC用量为8%，微粉硅胶用量为0.1%，模型相关系数较高。所制分散片崩解时间小于3 min，在50 min时，累积溶出度达到88%以上。

结论  优选工艺稳定可靠，可用于茅莓分散片的制备。

茅莓为蔷薇科悬钩子属植物茅莓Rubus parvifolius L.的干燥全草，始载于《植物名实图考》，具有清热凉血、活血止痛、散结消肿等功效[1]。现代药理研究表明茅莓总皂苷能通过抑制细胞凋亡、抗自由基等机制对脑梗死产生保护作用[2-3]。分散片为在水中能迅速崩解并分散均匀的片剂，具有崩解迅速、溶出均匀、吸收快、生物利用度高等特点，其能较好地契合茅莓总皂苷的药理作用[4-6]。中心复合设计-效应面法为制剂处方工艺优选常用的试验设计方法，能充分考虑到各影响因素间的相互作用，且可在中心点进行重现性试验，试验精确度较高，试验次数较少。故本研究采用中心复合设计-效应面法优选茅莓总皂苷分散片的处方工艺，并考察其溶出度，以期为茅莓的进一步开发利用提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV-1700 紫外-可见分光光度仪（日本岛津公司）；DP30A 单冲压片机（北京国药龙立科技有限公司）；KQ3200 型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AE240 型十万分之一电子天平（德国梅特勒-托利多公司）；FA1104型万分之一电子天平（上海天平仪器厂）；PYS-20型片剂硬度仪（上海黄海药检仪器厂）；ZRS-8G型智能溶出试验仪（天大天发科技有限公司）。

1.2 试药

茅莓药材由四川科伦天然药业有限公司提供，经成都中医药大学生药教研室卢先明教授鉴定为蔷薇科悬钩子属植物茅莓Rubus parvifolius L.的干燥全草；齐墩果酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号：0709-9803，含量≥95%）；羧甲基淀粉钠（carboxymethyl starch soldium，CMS-Na，四川翰华药用辅料有限公司，药用级，批号：20081064）；交联聚乙烯吡咯烷酮（polyvinyl polypyrrolidone，PVPP，安徽山河药用辅料股份有限公司，药用级，批号：121009）；微晶纤维素（microcrystalline cellulose，MCC，成都市科龙化工试剂厂，药用级，批号：20101027）；乳糖（成都市科龙化工试剂厂，批号：20101012）；淀粉（成都市科龙化工试剂厂，批号： 20100531）；低取代羟丙基纤维素（low substituted hydroxypropyl cellulose，L-HPC，安徽山河药用辅料股份有限公司，药用级，批号 160301）；微粉硅胶（安徽山河药用辅料股份有限公司，药用级，批号 110624）；硬脂酸镁（成都市科龙化工试剂厂，药用级，批号：110528）；D101型大孔吸附树脂（成都市科龙化工试剂厂，批号：20120305）；盐酸（成都市科龙化工试剂厂，分析级）；磷酸（成都市科龙化工试剂厂，分析级）；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 茅莓总皂苷浸膏粉的制备

称取茅莓药材适量，加入15倍量60%乙醇，提取3次，每次1.5 h，过滤，合并滤液，浓缩，加入乙醇沉淀，将醇沉物经D101型大孔吸附树脂进行纯化，浓缩，干燥，粉碎，即得[7]。

2.2 分散片的制备

称取处方量茅莓总皂苷浸膏粉，加入已混匀的填充剂、崩解剂和润滑剂，再次混匀，粉末直接压片，即得。

2.3 处方筛选

2.3.1 填充剂的筛选

选取常用的填充剂乳糖、淀粉和MCC，分别与浸膏粉及其他辅料混合均匀，用量为40%，粉末直接压片。以崩解时限、分散均匀性和压片情况为指标[8-13]考察填充剂种类，结果见表1。MCC崩解时间相对较短，分散均匀性符合要求，且无粘冲现象，片面光洁美观，同时兼具崩解作用，故选用MCC为填充剂。

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  表格1 填充剂筛选结果

  Table 1.Results of filler screening

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2.3.2 崩解剂的筛选

选取常用的崩解剂CMS-Na、L-HPC和PVPP，采用内加法的方式分别与浸膏粉及其他辅料混合均匀，用量为20%，粉末直接压片。以崩解时间和分散均匀性为指标考察崩解剂种类，结果见表2。单独或联合使用各类崩解剂均能满足崩解要求，单独使用PVPP，崩解时间最短，但PVPP价格较高，为降低成本，故联合使用PVPP 和L-HPC 作为崩解剂。

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  表格2 崩解剂筛选结果

  Table 2.Results of disintegrant screening

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2.3.3 润滑剂的筛选

选取常用润滑剂硬脂酸镁、微粉硅胶及两者混合物，分别与浸膏粉及其他辅料混合均匀，选定润滑剂常用量为0.1%[14]，粉末直接压片。以崩解时间和分散均匀为指标考察润滑剂种类，结果见表3。加入润滑剂后，分散片的分散均匀性均符合要求，但添加硬脂酸镁后崩解时间明显增加，故选用微粉硅胶为润滑剂。

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  表格3 润滑剂筛选结果

  Table 3.Results of lubricant screening

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2.4 处方比例优化

基于单因素试验结果，采用中心复合设计-效应面法优化处方工艺。根据试验设计，以MCC、PVPP和L-HPC为影响因素，崩解时间为评价指标，因素水平见表4。精密称取茅莓总皂苷粉末适量，加入不同比例的辅料，粉末直接压片，试验设计与结果见表5。

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  表格4 中心复合设计-效应面法分析因素与水平

  Table 4.Factors and levels for central composite design-response surface method

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  表格5 中心复合设计-效应面法分析试验设计与结果

  Table 5.Design and results of central composite design-response surface method

  注：*15～20号为重复试验，取平均值

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通过Design-Expert软件进行二次多项式拟合，得回归方程为Y=81-6.37X₁-8.23X₂+6.21X₃+2.25X₁X₂+4X₁X₃+7.25X₂X₃+9.52X₁²+3.85X₂²+9.35X₃²（R²=0.95），方程中

R²=0.95，P＜0.01，说明模型拟合度较好、可信度高，回归方程显著，试验设计可靠。对所得回归方程进行方差分析，结果见表6，表明MCC（X₁）、PVPP（X₂）、L-HPC（X₃）和交互项X₂X₃对结果有显著影响，其中PVPP（X₂）影响最大。根据回归方程拟合结果，作出崩解时间对三因素中任意两因素的响应面图，结果见图1~图3。综合上述结果并结合软件系统给出的优化工艺，确定辅料用量分别为MCC用量42%，PVPP用量13%，L-HPC用量8%，崩解时间为68 s。

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  表格6 回归模型的方差分析结果

  Table 6.Variance analysis results of regression model

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  图1 MCC和PVPP对崩解时间的响应面三维图

  Figure 1.Response surface diagram of MCC and PVPP to disintegration time

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  图2 MCC和L-HPC对崩解时间的响应面三维图

  Figure 2.Response surface diagram of MCC and L-HPC to disintegration time

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  图3 PVPP和L-HPC对崩解时间的响应面三维图

  Figure 3.Response surface diagram of PVPP and L-HPC to disintegration time

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2.5 验证试验

为进一步验证试验结果与模型是否相符，根据模型算出的崩解时间，以优选处方工艺进行3次验证试验，结果崩解时间分别为69，67 ，71 s，平均崩解时间为69 s，实测值与模型预测值接近，说明工艺条件合理、重复性好，模型可靠。

2.6 溶出度的测定

2.6.1 对照品溶液的制备

精密称取齐墩果酸对照品适量于25 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1 mL含齐墩果酸0.305 2 mg的对照品溶液。

2.6.2 供试品溶液的制备

取样品溶液适量，水浴挥干，加蒸馏水将残渣定容至50 mL，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次50 mL，合并正丁醇溶液，再用正丁醇饱和的水100 mL洗涤1次，收集正丁醇溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密移取溶液适量，依次加入0.2 mL新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液和0.8 mL高氯酸，摇匀，水浴（60℃）加热25 min，取出，用流水冷却，再加入5 mL冰醋酸，摇匀，备用[15]。

2.6.3 线性关系考察

精密吸取“2.6.1”项下齐墩果酸对照品溶液适量，以空白溶剂为随行对照，在450~600 nm波长范围内，用紫外-可见分光光度仪进行全波长扫描，确定测定波长为545 nm。分别精密吸取“2.6.1”项下齐墩果酸对照品溶液0，0.05，0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 mL于20 mL具塞试管中，按“2.6.2”项下方法，于545 nm波长处测定，以吸光度（A）对齐墩果酸质量（C, μg）进行线性回归，得回归方程为A=0.008 C-0.008 5（r=0.999 0），表明齐墩果酸在15.26~91.56 μg含量范围内线性关系良好。

2.6.4 溶出介质对溶出度的影响

参照中国药典2020年版四部[16]及相关文献 [17]，选用新制脱气蒸馏水、pH为6.8 的磷酸盐缓冲液和0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质，转速100 r·min^-1，按拟定的总皂苷测定方法测定含量，同法重复3次，计算各时间点溶出度（以平均累积溶出百分率计），结果见表7。由表可知，分散片在0.1 mol·L^-1的盐酸溶液中，总皂苷的溶出度最高，因此，选用0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质。

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  表格7 溶出介质对溶出度的影响（%，n=3）

  Table 7.Influence of dissolution medium on dissolution rate（%，n=3）

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2.6.5 溶出方法对溶出度的影响

参照中国药典2020年版四部[16]，选用0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质，转速100 r·min^-1，分别以桨法和篮法进行试验，按拟定的总皂苷测定方法测定含量，同法重复3次，计算各时间点溶出度（以平均累积溶出百分率计），结果见表8。由表可知，分散片在两种溶出方法下，总皂苷溶出效果基本相同，为防止片剂崩解过程中堵塞转篮筛网，采用桨法进行溶出度测定。

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  表格8 溶出方法对溶出度的影响（%，n=3）

  Table 8.Influence of dissolution method on dissolution rate（%，n=3）

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2.6.6 转速对溶出度的影响

参照中国药典2020年版四部[16]，选用0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质，分别采用75 r·min^-1和100 r·min^-1的转速，并用桨法进行试验，按拟定的总皂苷测定方法测定含量，同法重复3次，计算各时间点溶出度（以平均累积溶出百分率计），结果见表9。由表可知，转速对分散片总皂苷的溶出基本无影响，因此转速可以选择75 r·min^-1或100 r·min^-1。

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  表格9 转速对溶出度的影响（%，n=3）

  Table 9.Influence of rotational speed on dissolution rate（%，n=3）

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2.6.7 样品溶出度的测定

取3批分散片样品，参照中国药典2020版四部[16]，选用0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质，转速100 r·min^-1，采用桨法进行试验，按拟定的总皂苷测定方法测定含量并计算溶出度，结果见图4。结果表明，各批样品溶出度曲线基本吻合，分散片在50 min后溶出度基本趋于平稳，累积溶出度在88%以上。

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  图4 3批样品溶出度曲线

  Figure 4.Dissolution curves of three batches of samples

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3 讨论

分散片是指在水中能迅速崩解并均匀分散的片剂，其具有崩解迅速、吸收快和生物利用度高等特点。本文对填充剂、崩解剂及润滑剂进行了考察，并结合中心复合设计-效应面法对茅莓分散片进行了处方比例优化。在试验数据处理过程中，根据二次多项式模型方程拟定的结果，作出了崩解时间对3个考察因素中任意2个因素的响应面图，最终利用响应面图结合单因素筛选结果对处方工艺进行了预测，得到最优处方比例为： MCC用量42%，PVPP用量13%，L-HPC用量8%；单因素考察结果表明润滑剂为微粉硅胶，用量0.1%；计算得浸膏粉用量为36.9%。

溶出度是分散片质量控制的重要指标之一，本文参照中国药典2020版四部溶出度的测定方法，对茅莓分散片的溶出介质、溶出方法和转速进行了考察，确定选用0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为溶出介质，采用桨法，转速100 r·min^-1，结果茅莓分散片累积溶出度达到88%以上，为其质量控制提供了参考。本文通过对茅莓分散片处方工艺的优化及溶出度的测定，为茅莓的进一步开发利用提供了依据。本研究仍然存在一定局限性，针对茅梅分散片的制备和溶出度测定进行了研究，后续还需进一步完善其质量标准，且需进行药理研究。

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